[发明专利]用于实体瘤靶向的双特异性CAR T细胞

摘要

本文公开了双特异性T细胞的工程化方法，所述双特异性T细胞表达用于促进效应细胞的体内扩增和活化的嵌合抗原受体以及对肿瘤上的配体具有特异性的第二嵌合抗原受体或TcR。还提供了向有需要的受试者给予携带双特异性嵌合抗原受体的细胞的方法。

主权项

1.编码嵌合抗原受体的核酸，所述核酸包含：

包含编码前导序列的序列的第一核酸；

包含编码抗体或其结合片段或scFv的序列的第二核酸，其中所述抗体或其结合片段或scFv对B细胞特异性细胞表面分子具有特异性，并且其中所述第一核酸共价连接至所述第二核酸的5'末端；

包含编码去免疫细胞外间隔区的序列的第三核酸，其中所述第三核酸共价连接至所述第二核酸的3'末端；

包含编码跨膜结构域的序列的第四核酸，其中所述第四核酸共价连接至所述第三核酸的3'末端；

包含编码信号传导结构域的序列的第五核酸，其中所述信号传导结构域包含4‑1BB结构域和/或CD3‑ζ结构域，并且其中所述第五核酸共价连接至所述第四核酸的3'末端；

包含编码接头的序列的第六核酸，其中所述第六核酸共价连接至所述第五核酸的3'末端；以及

包含编码标记结构域的序列的第七核酸，其中所述第七核酸共价连接至所述第六核酸的3'末端，从而得到所述编码嵌合抗原受体的核酸。

2.编码嵌合抗原受体的核酸，所述核酸包含：

包含编码前导序列的序列的第一核酸；

包含编码可由药物诱导的第一启动子的序列的第二核酸，其中所述第一核酸共价连接至所述第二核酸的5'末端；

包含编码抗体或其结合片段或scFv的序列的第三核酸，其中所述抗体或其结合片段或scFv对B细胞特异性细胞表面分子具有特异性，并且其中所述第三核酸共价连接至所述第二核酸的3'末端；

包含编码去免疫细胞外间隔区的序列的第四核酸，其中所述第四核酸共价连接至所述第三核酸的3'末端；

包含编码跨膜结构域的序列的第五核酸，其中所述第五核酸共价连接至所述第四核酸的3'末端；

包含编码信号传导结构域的序列的第六核酸，其中所述信号传导结构域包含4‑1BB结构域和/或CD3‑ζ结构域，并且其中所述第六核酸共价连接至所述第五核酸的3'末端；

包含编码接头的序列的第七核酸，其中所述第七核酸共价连接至所述第六核酸的3'末端；以及

包含编码标记结构域的序列的第八核酸，其中所述第八核酸共价连接至所述第七核酸的3'末端，从而得到所述编码嵌合抗原受体的核酸。

3.编码嵌合抗原受体的核酸，所述核酸包含：

包含编码前导序列的序列的第一核酸；

包含编码抗体或其结合片段或scFv的序列的第二核酸，其中所述抗体或其结合片段或scFv对细胞表面肿瘤特异性分子具有特异性，并且其中所述第一核酸共价连接至所述第二核酸的5'末端；

包含编码去免疫细胞外间隔区的序列的第三核酸，其中所述第三核酸序列共价连接至所述第二核酸的3'末端；

包含编码跨膜结构域的序列的第四核酸，其中所述第四核酸共价连接至所述第三核酸的3'末端；

包含编码信号传导结构域序列的序列的第五核酸，其中所述信号传导结构域包含4‑1BB结构域、CD3‑ζ结构域和/或CD28‑ζ结构域，并且其中所述第五核酸共价连接至所述第四核酸的3'末端；

包含编码接头的序列的第六核酸，其中所述第六核酸共价连接至所述第五核酸的3'末端；以及

包含编码标记结构域的序列的第七核酸，其中所述第七核酸共价连接至所述第六核酸的3'末端，从而得到所述编码嵌合抗原受体的核酸。

4.编码嵌合抗原受体的核酸，所述核酸包含：

包含编码前导序列的序列的第一核酸；

包含编码可由药物诱导的第一启动子的序列的第二核酸，其中所述第一核酸共价连接至所述第二核酸的5'末端；

包含编码抗体或其结合片段或scFv的序列的第三核酸，其中所述抗体或其结合片段或scFv对细胞表面肿瘤特异性分子具有特异性，并且其中所述第三核酸共价连接至所述第二核酸的3'末端；

包含编码去免疫细胞外间隔区的序列的第四核酸，其中所述第四核酸序列共价连接至所述第三核酸的3'末端；

包含编码跨膜结构域的序列的第五核酸，其中所述第五核酸共价连接至所述第四核酸的3'末端；

包含编码信号传导结构域序列的序列的第六核酸，其中所述信号传导结构域包含4‑1BB结构域、CD3‑ζ结构域和/或CD28‑ζ结构域，并且其中所述第六核酸共价连接至所述第五核酸的3'末端；

包含编码接头的序列的第七核酸，其中所述第七核酸共价连接至所述第六核酸的3'末端；以及

包含编码标记结构域的序列的第八核酸，其中所述第八核酸共价连接至所述第七核酸的3'末端，从而得到所述编码嵌合抗原受体的核酸。

5.编码双特异性嵌合抗原受体的核酸，所述核酸包含：

包含编码前导序列的序列的第一核酸序列；

包含编码抗体或其结合片段或scFv的序列的第二核酸，其中所述抗体或其结合片段或scFv对B细胞特异性细胞表面分子具有特异性或者对细胞表面肿瘤特异性分子具有特异性，并且其中所述第一核酸共价连接至所述第二核酸的5'末端；

包含编码抗体或其结合片段或scFv的序列的第三核酸，其中所述抗体或其结合片段或scFv对B细胞特异性细胞表面分子具有特异性或者对细胞表面肿瘤特异性分子具有特异性，并且其中所述第三核酸共价连接至所述第二核酸的3'末端；

包含编码去免疫细胞外间隔区的序列的第四核酸，其中所述第四核酸共价连接至所述第三核酸的3'末端；

包含编码跨膜结构域的序列的第五核酸，其中所述第五核酸共价连接至所述第四核酸的3'末端；

包含编码信号传导结构域序列的序列的第六核酸，其中所述信号传导结构域包含共刺激结构域，其中所述共刺激结构域包含4‑1BB结构域、CD3‑ζ结构域和/或CD28‑ζ结构域，并且其中所述第六核酸共价连接至所述第五核酸的3'末端；

包含编码接头的序列的第七核酸，其中所述第七核酸共价连接至所述第六核酸的3'末端；以及

包含编码标记结构域的序列的第八核酸，其中所述第八核酸共价连接至所述第七核酸的3'末端，从而得到所述编码双特异性嵌合抗原受体的核酸。

6.编码双特异性嵌合抗原受体的核酸，所述核酸包含：

包含编码前导序列的序列的第一核酸；

包含编码可由药物诱导的第一启动子的序列的第二核酸，其中所述第一核酸共价连接至所述第二核酸的5'末端；<