[发明专利]解释Taylor色散数据的分析方法

摘要

公开了用于制备色散陡度的方法以及用于在存在竞争剂分子时确定全动力学和亲和力分析的SPR注入方法。SPR注入提供了两个或更多个样本到SPR流动池和检测器的色散陡度。

主权项

1.一种用于确定非均相溶液中单体的聚集体形式的存在的方法，包括：识别所述溶液内的至少一种单体并确定所述单体的Dm；确定所述溶液内的总分析物浓度(Ctot)，所述总分析物浓度包括存在于所述溶液中的单体浓度(Cm)和任何聚集体浓度(Ca)两者；通过使用脉冲注入技术在Taylor色散条件下注入包含所述单体和聚集体的所述溶液的样本，对所述样本执行SPR分析；在Taylor色散条件下确定SPR本体折射率响应曲线；使用最小二乘拟合技术，将方程#1a拟合到用于所述样本的SPR本体折射率响应曲线：(方程#1a)其中Cm＝单体浓度Ca＝聚集体浓度Ctot＝总蛋白质浓度(单体加聚集体)(方程#1b)Cm＝Ctot‑Cadndc＝分析物的RII(通常为mL/mg*RU)Vi＝样本注入体积(m3)d＝管道直径(m)T＝平均分析物停留时间＝L/u(s)L＝管长(m)u＝流体的平均速度(m/s)km＝单体物质的Taylor‑Aris色散系数(m2/s)ka＝聚集体物质的Taylor‑Aris色散系数(m2/s)Dm＝单体物质的分析物扩散系数(m2/s)Da＝聚集体物质的分析物扩散系数(m2/s)在将方程#1a拟合到本体折射率响应曲线之后，由此提供近似的Ca，求解Da，其中，当Da不等于Dm时，提供在所述非均相溶液中存在单体的聚集体形式的肯定确定。