[发明专利]全基因组数字扩增的方法在审
| 申请号： | 201680090529.4 | 申请日： | 2016-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109923214A | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | X·S·谢;邢栋;张棋涵 | 申请（专利权）人： | 哈佛学院董事及会员团体 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 余颖;钱文宇 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本公开提供了一种用于基因组DNA扩增的方法，如全基因组扩增，包括使用转座酶系统制造包含引物结合位点的基因组DNA的片段，在油中分离在其自身水性微滴内的各片段以及PCR扩增试剂，扩增在其自身水性微滴内的各片段，使微滴反乳化以获得扩增子，并对扩增子进行测序。 | ||
| 搜索关键词： | 扩增 微滴 基因组DNA 全基因组 扩增子 引物结合位点 系统制造 转座酶 测序 乳化 | ||
【主权项】：
1.一种基因组核酸扩增的方法，其包括：将基因组DNA与多个转座酶与转座子DNA结合二聚体接触，其中所述转座子DNA包含转座酶结合位点，任选的条码序列和引物结合位点，其中所述多个二聚体结合沿着双链核酸分布的靶位置，而所述转座酶将所述基因组DNA切割成多个双链基因组DNA片段，所述基因组DNA片段代表基因组DNA片段文库，其中各双链基因组DNA片段具有与所述双链基因组DNA片段各5'末端结合的所述转座子DNA，对所述转座子DNA和所述基因组DNA片段之间的缺口进行缺口填平，以形成各末端具有引物结合位点的双链基因组DNA片段延伸产物的文库，在油相内产生多个水性液滴的亚组，其中所述亚组的各水性液滴包含所述文库的单个双链基因组DNA片段延伸产物和扩增试剂，对于所述亚组的各水性液滴，在其中扩增所述双链基因组DNA片段以在所述水性液滴内产生所述双链基因组DNA片段的扩增子，其中扩增在所述亚组的所有液滴中发生，和由所述亚组的水性液滴收集所述扩增子。
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