[发明专利]一种疟原虫pf/pan检测试纸的制备方法

摘要

本发明公开了一种疟原虫pf/pan检测试纸的制备方法，包括步骤为用恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体和疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体标记的免疫金分别对玻璃纤维素膜喷金，得到pf金垫和pan金垫，用恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体检测线包被液、疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体检测线包被液和对照线包被液分别在粘有硝酸纤维素膜的聚氯乙烯底板上划线，得到点膜的聚氯乙烯底板；将样品垫、金垫、点膜的聚氯乙烯底板和吸水纸组装在一起，切割成检测试纸。本发明得到的检测试纸基于免疫侧向流层析技术，能够通过手工操作、肉眼读取判断血液样本中是否含有疟原虫pf/pan，诊断快速且结果准确，不会对受检者身体造成伤害。

主权项

一种疟原虫pf/pan检测试纸的制备方法，其特征在于，包括步骤为：（1）制备pf重悬液：所述pf重悬液中包括三羟甲基氨基甲烷、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白和吐温20，将三羟甲基氨基甲烷、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白和吐温20溶于水并定容，调节pH值至8‑9得到；制备pan重悬液：所述pan重悬液中包括三羟甲基氨基甲烷、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白和酪蛋白，将三羟甲基氨基甲烷、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白和酪蛋白溶于水并定容，调节pH值至8‑9得到；制备包被基液：海藻糖溶于pH值为7‑8的磷酸缓冲溶液并定容得到；（2）将胶体金与碳酸钾混合并调节pH值，再加入恶性疟原虫乳酸脱氢酶pfLDH单克隆抗体、牛血清白蛋白溶液混合，离心得到第一沉淀，所述第一沉淀用所述pf重悬液重悬，得到pf免疫金；将胶体金与碳酸钾混合并调节pH值，再加入疟原虫乳酸脱氢酶panLDH单克隆抗体、牛血清白蛋白溶液混合，离心得到第二沉淀，所述第二沉淀用所述pan重悬液重悬，得到pan免疫金；（3）用所述包被基液稀释所述恶性疟原虫乳酸脱氢酶pfLDH单克隆抗体得到恶性疟原虫乳酸脱氢酶pfLDH单克隆抗体检测线包被液；用所述包被基液稀释所述疟原虫乳酸脱氢酶panLDH单克隆抗体得到疟原虫乳酸脱氢酶panLDH单克隆抗体检测线包被液；用所述包被基液稀释羊抗鼠IgG多抗得到对照线包被液；（4）用所述pf免疫金对金垫喷金得到pf免疫金垫；用所述pan免疫金对金垫喷金得到pan免疫金垫；用所述恶性疟原虫乳酸脱氢酶pfLDH单克隆抗体检测线包被液、所述疟原虫乳酸脱氢酶panLDH单克隆抗体检测线包被液和所述对照线包被液分别在贴于聚氯乙烯底板的硝酸纤维素膜上划线，得到点膜的聚氯乙烯底板；（5）将样品垫、所述pf免疫金垫、所述pan免疫金垫、所述点膜的聚氯乙烯底板和吸水纸组装在一起，切割成疟原虫pf/pan检测试纸。