[发明专利]一种梅叶冬青组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种梅叶冬青组织培养快速繁殖方法。本发明实现了野生梅叶冬青组织培养快速繁殖，为野生梅叶冬青组织培养技术开辟新道路。本发明的方法操作简单，易于实施，可一次性培育出大量的梅叶冬青生长幼苗。本发明能够有效的缩短育苗时间，且本发明所用的培养基和试剂易配置，成本低，易大范围推广。

主权项

1.一种梅叶冬青组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：a、选取健康无病虫害8‑12cm的梅叶冬青当年新抽带芽枝条，去除枝条的叶，用酒精棉拭去枝条表面的灰尘并剪成3‑5段，每段带有1‑2个休眠芽点的枝段作为外植体；b、将外植体灭菌，然后将灭菌后的外植体插入初代诱芽培养基中培养诱导出腋芽或顶芽，培养条件为：1500‑2000Lx，24℃‑28℃，光照时间12h‑14h，黑暗时间12h‑10h，所述的初代诱芽培养基每升由以下成分组成：1mg ZT、0.05mg NAA、6.2g琼脂、0.1g肌醇、30g蔗糖，余量为MS培养基，pH 5.8‑6.0；c、将腋芽或顶芽切下，接入不定芽增殖培养基中进行增殖培养获得不定芽，培养条件为：1500‑2000Lx，24℃‑28℃，光照时间12h‑14h，黑暗时间12h‑10h，所述的不定芽增殖培养基每升由以下成分组成：1mg 6‑BA、0.05mgNAA、6.2g琼脂、0.1g肌醇、20g蔗糖，余量为MS培养基，pH 5.8‑6.0；d、将不定芽接入壮苗培养基进行壮苗培养得到无根壮苗，培养条件为：1500‑2000Lx，24℃‑28℃，光照时间12h‑14h，黑暗时间12h‑10h，所述的壮苗培养基每升由以下成分组成：0.1mg 6‑BA、0.1mg NAA、6.2g琼脂、0.1g肌醇、20g蔗糖，余量为MS培养基，pH 5.8‑6.0；e、将2‑3cm高带有3‑5个叶片的无根壮苗接入生根诱导培养基中培养得到组培苗，培养条件为：1500‑2000Lx，24℃‑28℃，光照时间12h‑14h，黑暗时间12h‑10h，所述的生根诱导培养基每升由以下成分组成：1mg IBA、0.02g AC、6.2g琼脂、0.1g肌醇、20g蔗糖，余量为1/2MS培养基，pH 5.8‑6.0；f、将组培苗进行移栽培养。