[发明专利]同时检测对虾WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的多重PCR检测试剂盒

摘要

本发明属于海洋生物病原检测技术领域，具体涉及一种同时检测对虾WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的多重PCR检测试剂盒。采用多重PCR检测方法，能够一次性同时利用WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的专用检测引物WSSV‑F和WSSV‑R、AHPND‑F和AHPND‑R、EHP‑F和EHP‑R、IHHNV‑F和IHHNV‑R进行四种病原DNA的扩增。本发明是一种方便快捷，检测限低，且特异性强、灵敏度高、准确率高、且能同时检测对虾白斑综合征病毒、对虾急性肝胰腺坏死症(pirVP)、虾肝肠胞虫、传染性皮下及造血组织坏死病毒的多重PCR检测方法。

主权项

一种同时检测对虾WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的多重PCR检测方法，其特征在于：采用多重PCR检测方法，能够一次性同时利用WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的专用检测引物WSSV‑F和WSSV‑R、AHPND‑F和AHPND‑R、EHP‑F和EHP‑R、IHHNV‑F和IHHNV‑R进行四种病原的扩增，引物序列如下：对虾白斑综合征病毒WSSV上游引物：WSSV‑F：TTCTCACCTCATGCTTTCTTCC           SEQ ID NO:1下游引物：WSSV‑R：TACTTGCTTAGAGATGGCTTCG           SEQ ID NO:2对虾急性肝胰腺坏死症AHPND上游引物：AHPND‑F：GGAAGTCGGTCGTAGTGTAG            SEQ ID NO:3下游引物：AHPND‑R：ATATCGCATAACCAAGCCATTC          SEQ ID NO:4虾肝肠胞虫EHP上游引物：EHP‑F：GAGAGTAGCGGAACGGATAG              SEQ ID NO:5下游引物：EHP‑R：GCATCACGGACCTGTTATTG              SEQ ID NO:6传染性皮下及造血组织坏死病毒IHHNV上游引物：IHHNV‑F：AAGAGCAGCGACAGTTCAG             SEQ ID NO:7下游引物：IHHNV‑R：CGGCTTCCTTAGTTGATAGTTG          SEQ ID NO:8；所述4对病原引物彼此间无交叉，且不与其它病原产生交叉。