[发明专利]一种减少污染的稻曲病菌薄壁分生孢子的制备培养方法

摘要

本发明公开了一种减少污染的稻曲病菌薄壁分生孢子的制备培养方法，采用三角瓶作制备培养器具、以马铃薯培养基作产孢培养基，制备培养高质量的稻曲病菌薄壁分生孢子，制备培养方法步骤如下1)将三角瓶洁净备用；2)制备马铃薯培养基的瓶式产孢培养基；3)母代稻曲病菌的移植；4)在合适温度下产孢培养；5)洗脱收集新一代薄壁分生孢子。本发明的优点是1)无需振荡培养设备；孢子液成品含杂物较少；制备进程快速、效率高、孢子量大；2)制备培养过程能高效地减少污染；3)三角瓶的保护可使得产孢菌落能随意放置一段时间而不受污染，并保持产孢状态，便于与需要孢子的工作程序衔接。

主权项

一种减少污染的稻曲病菌薄壁分生孢子的制备培养方法，其特征在于，制备培养方法的步骤如下：1)采用普通三角瓶作制备培养孢子的器具，将三角瓶洁净备用；2)瓶式产孢培养基的制备：用马铃薯培养基作产孢培养基，该培养基的配比为：马铃薯100g、琼脂20g、水1000mL；将培养基分装于步骤1)准备的三角瓶，常规高压高温灭菌后成为三角瓶式培养基，备用；3)母代稻曲病菌的移植：以实验室已有的稻曲病菌分生孢子液作母代菌体，用移液器将该母代孢子液移植入步骤2)制备的三角瓶式培养基，并使孢子液在培养基面上分散均匀；4)产孢培养：将步骤3)操作完备后的三角瓶式培养基转入温度为28℃的普通培养箱内培养；5)新一代孢子的收集：通常步骤4)培养5天后，培养基面上已形成大量的微小菌落，菌落上形成大量的分生孢子；用无菌水洗脱菌落上的孢子，并集中到灭菌容器内，即获得无杂菌污染的较高质量的稻曲病菌薄壁分生孢子液。