[发明专利]寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒核酸检测试剂盒及其用途

摘要

本发明公开了一种寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒核酸检测试剂盒及其用途，所述试剂盒包括以下各组分：RT‑PCR反应液、酶混合液、寨卡病毒/登革热病毒/基孔肯雅病毒/内标基因四重反应液、阳性对照和空白对照。本发明寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒检测试剂盒能够在同一反应管中同时检测出寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒，解决了现有体外检测试剂盒无法在同一反应管中同时检测寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒的问题。此外，本发明检测试剂盒还具有特异性强、灵敏度高，操作简便、可重复性强、检测结果快速客观等优点，本发明的提出为寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒的体外检测提供了一种有效的技术手段。

主权项

1.一种寨卡病毒、登革热病毒和基孔肯雅病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，包括以下各组分：RT‑PCR反应液、酶混合液、寨卡病毒/登革热病毒/基孔肯雅病毒/内标基因四重反应液、阳性对照和空白对照，其中所述的内标基因为人看家基因；其中，所述的寨卡病毒/登革热病毒/基孔肯雅病毒四重反应液包括以下4组组分：组分(1)：由一对检测寨卡病毒的引物对和一条检测寨卡病毒探针组成，其中，所述的引物对的碱基序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；所述探针的碱基序列如SEQ ID No.3所示，其中，SEQ ID No.3的5′端标记有荧光报告基团，3′端标记有荧光淬灭基团；组分(2)：由一对检测登革热病毒的引物对和一条检测登革热病毒的探针组成，其中，所述的引物对的碱基序列分别为SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示；所述探针的碱基序列如SEQ ID No.6所示；其中，SEQ ID No.6的5′端标记有荧光报告基团，3′端标记有荧光淬灭基团；组分(3)：由一对检测基孔肯雅病毒的引物对和一条检测基孔肯雅病毒的探针组成，其中，所述的引物对的碱基序列分别为SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示；所述探针的碱基序列为SEQ ID No.9所示；其中SEQ ID No.9的5′端标记有荧光报告基团，3′端标记有荧光淬灭基团。组分(4)：由一对检测人看家基因的引物对和一条检测人看家基因的探针组成，其中，所述的引物对的碱基序列分别为SEQ ID No.10和SEQ ID No.11所示；所述探针的碱基序列为SEQ ID No.12所示；其中SEQ ID No.12的5′端标记有荧光报告基团，3′端标记有荧光淬灭基团；其中，优选的，所述荧光报告基团选自FAM、VIC、ROX、CY3或CY5荧光报告基团，且组分(1)、组分(2)、组分(3)以及组分(4)选自不同的荧光报告基团；荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1和Tamra中的任意一种或几种，但要求其能够淬灭标记在同一条探针上的荧光报告基团。