[发明专利]一种重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的高密度发酵方法在审
申请号: | 201710034661.X | 申请日: | 2017-01-18 |
公开(公告)号: | CN106995793A | 公开(公告)日: | 2017-08-01 |
发明(设计)人: | 孙珊珊;王建;程雪娇;王宇鹏;李丽琴;朱士江;杨雪;王猛;于小婷;姬荣曼;杜宁宁;焦晓军;余贵菊;甄盼盼;姜淋洁;张立会;王勇;崔志刚 | 申请(专利权)人: | 天津市中升挑战生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙)12214 | 代理人: | 陈昌娟 |
地址: | 300380 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的高密度发酵方法。本发明的方法包括将重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌进行冻干保藏,并经过活化、摇瓶培养、种子培养后转入发酵罐进行通气搅拌发酵培养,在发酵罐培养过程中通过提高搅拌转速及空气流量来保证溶氧水平,采用补料分批培养,变指数‑恒pH值混合流加补料的方法来进行重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的高密度发酵。本发明降低了发酵过程中由于菌种退化导致生产异常现象的出现,优化了发酵、补料培养基及补料方法,提供的发酵方法具有发酵工艺简单,能够获得理想的高活菌浓度和稳定性好等优点,可用于重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的规模化生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 粒细胞 集落刺激因子 工程 高密度 发酵 方法 | ||
【主权项】:
一种重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌发酵培养基,其特征在于:由以下组分组成:葡萄糖8~15g/L、胰化蛋白胨15~25g/L、酵母提取物10~15g/L、KH2PO4 2~4g/L、K2HPO4 5~8g/L、Na2HPO4·12H2O 6~8g/L、(NH4)2SO4 2~4g/L、NH4Cl 0.1~0.3g/L、MgSO4·7H2O 1.0~1.5g/L、微量元素5~10ml/L及消泡剂0.5~1ml/L,所述微量元素成分为:MnSO4·5H2O 0.3~0.5g/L、ZnCl2 0.5~1g/L、CoCl2·6H2O 1~2g/L、Na2MO4·2H2O 0.5~1g/L、CuSO4·5H2O 1~1.85g/L、FeSO4·7H2O 5~10g/L、H3BO3 0.3~0.5g/L、CaCl2·2H2O 5~10g/L。
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