[发明专利]一种用于阿胶真伪鉴定的组合物、试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种用于阿胶真伪鉴定的组合物、试剂盒及其检测方法。所述组合物由多肽I、多肽II、多肽III以及对照品检测基质组成，所述多肽I的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示，多肽II的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示，多肽III的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示，对照品检测基质为鱼皮胶。利用该组合物检测阿胶中驴皮源成分含量，从而判断阿胶真伪。具体的，通过多肽I的检测值减去多肽II的检测值，并利用多肽III的检测值来修正检测偏差，从而实现对阿胶中驴皮源成分的含量检测，利用驴皮源性成分含量来鉴定阿胶真伪。该方法具有含量检测准确、操作简单的优点，在阿胶的真伪鉴别方面具有广泛的应用前景。

主权项

1.一种鉴定阿胶真伪的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1)对照品溶液的制备：/n对照品检测基质粉碎后，称取一定量的对照品检测基质于量瓶中，加入NH₄HCO₃溶液，超声使样品完全溶解，得到基质溶液，用配制得到的基质溶液溶解称量好的多肽I、多肽II和多肽III，摇匀，得到对照品母液，采用分步稀释的方法，以基质溶液为溶剂，将对照品母液稀释500-10⁵倍，微孔滤膜过滤，续滤液中加胰蛋白酶溶液，酶解；/n所述多肽I的氨基酸序列为Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Pro-Val-Gly-Lys，多肽II的氨基酸序列为His-Gly-His-Arg，多肽III的氨基酸序列为Gly-Val-Val-Gly-Pro-Gln-Gly-Ala-Arg，对照品检测基质为鱼皮胶；/n2)待检测样品溶液的制备：/n取待测纯品胶样品于量瓶中，加NH₄HCO₃溶液溶解，微孔滤膜过滤，续滤液加胰蛋白酶酶解；/n3)将对照品溶液、待检测样品溶液分别放入液质联用仪，选择m/z469.5→457.3、655.4，m/z253.8→312.2，369.2，m/z421.0→684.4、528.3作为检测离子对进行MRM扫描，其中选择m/z469.5→457.3、m/z253.8→312.2、m/z421.0→684.4分别作为多肽I、多肽II和多肽III的定量离子对，待检测阿胶样品中多肽I的含量记为M₁、多肽II的含量记为M₂、多肽III的含量记为M₃；/n4)按下式计算出阿胶样品中阿胶的含量：/n阿胶中驴皮源成分的含量％＝(M₁/937.1–M₂/505.5)×840/M₃×100％。/n