[发明专利]均相检测EGFR等位基因19外显子突变指数的方法在审

专利信息
申请号: 201710044212.3 申请日: 2017-01-19
公开(公告)号: CN106834458A 公开(公告)日: 2017-06-13
发明(设计)人: 张菊;张潍;王晓栋;王金燕;姜英浩;刘文超 申请(专利权)人: 中国人民解放军第四军医大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 西安新思维专利商标事务所有限公司61114 代理人: 李罡
地址: 710032 *** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明涉及均相检测EGFR等位基因19外显子突变指数的方法,对特定试剂扩增,然后对扩增产物行FAM和R110荧光偏振值检测,据FAM和R110荧光偏振值的高低变化和比值判读待测标本EGFR等位基因19外显子突变指数。本发明创造性地提出了EGFR等位基因19外显子突变指数及对EGFR等位基因19外显子突变指数进行检测的方法,EGFR等位基因19外显子突变指数是较EGFR等位基因19外显子变异型绝对数量与药物反应性更高度相关、更敏感特异的分子标识,检测EGFR等位基因19外显子突变指数是较仅检测变异型别和绝对数量更科学准确、标准量化、更有预测价值的检测。
搜索关键词: 均相 检测 egfr 等位基因 19 外显子 突变 指数 方法
【主权项】:
均相检测EGFR等位基因19外显子突变指数的方法,其特征在于:所用试剂包括:MgCl2,10×PCR反应缓冲液,dNTPs,EGFR等位基因19外显子DNA引物,EGFR等位基因19外显子E746‑A750,2236到2250位碱基的15bp缺失突变DNA的FAM标记探针、EGFR等位基因19外显子E746‑A750,2236到2250位碱基的15bp野生型DNA的R110标记探针,模板:待检测样品DNA,阴性对照标准品即pGEM‑T‑easy空载体、阳性对照标准品即EGFR等位基因19外显子野生型对照标准品与19外显子突变型对照标准品的混合物,浓度均为1000拷贝/ml;对试剂分别进行扩增,然后对扩增产物分别进行FAM和R110荧光偏振值的检测,阳性对照标准品FAM和R110荧光偏振值分别大于阴性对照标准品FAM和R110荧光偏振值30mp以上则为扩增成功,根据待检测样品FAM和R110荧光偏振值与阳、阴性对照标准品的差值高低变化和比值判读待检测样品的EGFR等位基因19外显子突变指数。
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