[发明专利]一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离方法有效
| 申请号： | 201710067351.8 | 申请日： | 2017-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN107354130B | 公开（公告）日： | 2020-09-29 |
| 发明（设计）人： | 吴韶清;欧志英;金宇林;李发涛;唐婕;吴洁莹;陈劲松;谢闺娥;陆琰;梁绮华;刘东 | 申请（专利权）人： | 广州市妇女儿童医疗中心(广州市妇幼保健院;广州市儿童医院;广州市妇婴医院) |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/0735 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 许飞 |
| 地址： | 510623 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离方法，包括：1)取健康人胎盘绒毛膜组织，剪成条块状，用生理盐水充分冲洗；2)加入适量生理盐水，用匀浆器将绒毛膜切碎为细小颗粒，用生理盐水冲洗至澄清；3)再次用匀浆器处理至微小颗粒后，离心去除上层血细胞；4)沉淀中加入酶进行消化，离心分离沉淀；5)用生理盐水离心洗涤两次后，沉淀中加入培养基接种培养；6)第7天弃除组织块和培养液，用生理盐水冲洗培养瓶底后，加入新鲜培养基，之后每3天更换培养基至细胞融合度达80‑90%，用胰酶消化传代，即得人胎盘绒毛膜间充质干细胞。本发明操作简便快捷，可获得高质量的人胎盘绒毛膜间充质干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 胎盘 绒毛 膜间充质 干细胞 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离方法，包括如下步骤：1）取人胎盘绒毛膜组织，剪成1‑3cm条块状，用生理盐水充分冲洗，并称量绒毛膜湿重；2）用手持式电动匀浆器处理绒毛膜至细小颗粒，再次用生理盐水冲洗至澄清；3）再次用匀浆器处理至微小颗粒后，离心去除上层血细胞；4）沉淀中加入同体积的胰蛋白酶和胶原酶Ⅱ，于37℃消化；5）用生理盐水离心洗涤两次后，沉淀中加入培养基，置于37℃、5%CO2培养箱中培养；6）第7天弃除组织块和培养液，用生理盐水冲洗培养瓶底后，加入新鲜培养基，之后每3天更换培养基至细胞融合度达80‑90%，用胰酶消化传代，即得人胎盘绒毛膜间充质干细胞。
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