[发明专利]一类可调控的腐胺生物荧光传感器及其应用有效

专利信息
申请号: 201710068234.3 申请日: 2017-01-19
公开(公告)号: CN108330139B 公开(公告)日: 2021-06-15
发明(设计)人: 钱志刚;陈雪枫;夏小霞 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/66 分类号: C12N15/66;C12N15/70;G01N21/64
代理公司: 上海交达专利事务所 31201 代理人: 王毓理;王锡麟
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 一类可调控的腐胺生物荧光传感器及其应用,将含有对腐胺具有响应的人工设计启动子的重组质粒pAR2gfp、pLR2gfp、pAR3gfp、pLR3gfp、pTacR2gfp、pTacR3gfp转入大肠杆菌MG1655中,建立了一种绿色荧光蛋白标记的生物荧光检测系统,当环境中存在腐胺时,诱导启动GFPmut3蛋白表达,此时检测荧光强度。本发明利用荧光标记技术构建腐胺生物荧光传感器,通过检测荧光强度对腐胺进行定性及定量分析,为腐胺检测提供技术和方法,同时通过改变腐胺识别元件PuuR的表达水平和培养基可以调节传感器的响应范围,在生产菌株的筛选和实时监测腐胺合成过程以及环境检测等方面有很重要的应用。
搜索关键词: 一类 调控 生物 荧光 传感器 及其 应用
【主权项】:
1.一种腐胺生物荧光检测方法,其特征在于,通过将PuuR的同源操作序列插入到强启动子中,然后将人工设计的启动子基因片段插入到绿色荧光蛋白的上游,采用绿色荧光蛋白作为报告蛋白,通过绿色荧光的强度定量检测环境中腐胺的浓度,所述的PuuR蛋白特异性识别序列如Seq ID No.1所示,应用于构建腐胺生物荧光传感器的人工设计启动子。
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