[发明专利]人工染色体载体在审
| 申请号： | 201710073136.9 | 申请日： | 2009-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN107012168A | 公开（公告）日： | 2017-08-04 |
| 发明（设计）人： | 安东.鲍尔;埃米利奥.M.卡萨诺瓦赫维亚;利安德.布拉斯 | 申请（专利权）人： | 安东.鲍尔;埃米利奥.M.卡萨诺瓦赫维亚 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所11105 | 代理人： | 张文辉,张晓飞 |
| 地址： | 奥地利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 依照本发明，提供了一种在真核细胞系中生产蛋白质的方法，包括下述步骤a)提供人工染色体的骨架，b)将编码所述蛋白质的核酸重组入所述骨架中以生成表达载体，c)将所述表达载体导入真核宿主细胞系中以获得真核表达细胞系，d)培养所述表达细胞系以生成所述蛋白质，并e)分离所述蛋白质。本发明进一步涉及各自的载体和转基因细胞系。 | ||
| 搜索关键词： | 人工 染色体 载体 | ||
【主权项】：
在选自HEK细胞，如HEK293、CHO、COS、NS0细胞、PerC‑6、或Sf9细胞的真核生产细胞系中生产蛋白质的方法，包括下述步骤：a)提供人工染色体骨架，所述人工染色体骨架含有丰富蛋白质的基因座，所述基因座含有开放染色质形成或蛋白质表达的调节元件，b)将编码所述蛋白质的核酸重组入所述骨架中以生成表达载体，其中所述载体含有异源启动子，c)将所述表达载体线性化并整合入真核宿主细胞系中以获得真核表达细胞系，其中至少10个拷贝的所述人工染色体稳定整合至所述宿主细胞的染色体中，所述表达细胞系具有至少30次传代的稳定性；d)培养所述表达细胞系以生成所述蛋白质，并e)分离所述蛋白质。
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