[发明专利]一种从液体深层发酵灵芝中提取灵芝肽的方法

摘要

本发明公开了一种液体深层发酵灵芝中提取灵芝肽的方法。它包括以下步骤A芝深层发酵培养，B、将7吨发酵罐中的灵芝发酵原液升温，加入酸性纤维素酶，搅拌酶解3~4小时，得到灵芝酶解液；C、将上述灵芝酶解液降至40~45℃，并加入质量浓度为10%的NaOH溶液；D、板框压滤将所述步骤C酶解灵芝混合液取出；E、采用孔径1~8nm的膜过滤步骤D的灵芝酶解原液，收集透过液，向截留液中加水稀释后再过滤，F、将步骤E得到的精制液，蒸发浓缩至固含量为35~55%真空干澡或喷雾干燥得到灵芝肽粉。本发明的有益效果在于在深层发酵灵芝后处理工艺简单，设计合理，加工灵活。酶解提取的灵芝肽分子量小，可以做为新一代低聚肽原料，实现了深层发酵灵芝高值化利用。

主权项

一种液体深层发酵灵芝后提取灵芝肽的方法，包括以下步骤：A:芝深层发酵培养a、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃，取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天；b、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min；c、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤b中稀释搅拌后的培养基负压吸入300L种子罐中，培养2～3天；d、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤c中搅拌后的培养基负压吸入1.5吨的种子罐中，培养2～3天；e、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤d中培养后的培养基负压吸入7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵;B、将7吨发酵罐中的灵芝发酵原液升温至45~55℃，加入20000u/g的酸性纤维素酶，加入量为发酵罐实际装量的0.0001~0.0004%，搅拌酶解3~4小时，得到灵芝酶解液；C、将上述灵芝酶解液降至40~45℃，并加入质量浓度为10%的NaOH溶液，调节pH至7.0~9.0，加入发酵罐实际装量的0.006~0.012%的复合蛋白酶，搅拌酶解3~5小时，升温至85~95℃，灭酶活10~30分钟；D、板框压滤：将所述步骤C酶解灵芝混合液取出，用50～60kg的压力压滤，除去固体物，得到灵芝酶解原液；E、采用孔径1~8nm的膜过滤步骤D的灵芝酶解原液，收集透过液，向截留液中加水稀释后再过滤，重复4~6次，合并收集的透过液，将所述的透过液进行电渗析至液体电导率小于30μs/㎝２、活性炭精制、脱炭，得到精制液；F、将步骤E得到的精制液，蒸发浓缩至固含量为35~55%真空干澡或喷雾干燥得到灵芝肽粉。