[发明专利]一种回收片段化降解DNA的方法有效
| 申请号： | 201710086527.4 | 申请日： | 2017-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN106834274B | 公开（公告）日： | 2019-12-06 |
| 发明（设计）人： | 魏冬凯;丁国徽;窦权 | 申请（专利权）人： | 苏州贝斯派生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 32256 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 王锋<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种回收片段化降解DNA的方法。该方法包括：在降解DNA的溶液中加入羧基磁珠，使大片段DNA与羧基磁珠结合，而使小片段DNA保留于溶液中；将结合有大片段DNA的羧基磁珠与包含小片段DNA的溶液分离；使大片段DNA与羧基磁珠分离，再对大片段DNA进行片段化处理，直至形成小片段DNA；回收所述包含小片段DNA的溶液中的小片段DNA以及由大片段DNA经片段化处理形成的小片段DNA。本发明提供的回收片段化降解DNA方法大大提高了片段化降解DNA纯化回收率，为该类样本用于下游分子生物学研究提供了有效保障，且该方法所用试剂成分简单，操作方便，成本低廉，不需特殊设备，并提高片段化降解DNA回收率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 回收 片段 降解 dna 方法 | ||
【主权项】：
1.一种回收片段化降解DNA的方法，其特征在于包括：/n(1)取降解DNA溶于水，形成降解DNA溶液，所述降解DNA的溶液中降解DNA的浓度为1μg/30μL～1μg/150μL；/n(2)向降解DNA溶液中加入羧基磁珠，混合均匀后，在室温下孵育，使羧基磁珠与大片段DNA充分结合而使小片段DNA保留于溶液中，所述大片段DNA的尺寸大于2000bp，所述小片段DNA的尺寸为200bp～2000bp；/n(3)利用磁场作用使羧基磁珠沉降，直至混合液澄清，再分离出羧基磁珠，并收集包含小片段DNA的澄清液；/n(4)对羧基磁珠进行清洗；/n(5)将羧基磁珠室温干燥后，以洗脱液进行洗脱，并在室温下放置；/n(6)利用磁场作用使步骤(5)所获洗脱混合液达到澄清，再将澄清溶液分离出；/n(7)将步骤(6)分离出的澄清溶液转移至片段化仪中进行片段化处理，使其中的大片段DNA被打断为小片段DNA；/n(8)将步骤(7)所获的含小片段DNA的溶液与步骤(3)所获的包含小片段DNA的澄清液合并；/n(9)将步骤(8)最终所获的含小片段DNA的溶液与磷酸盐缓冲液均匀混合后加入离心柱；/n向所述离心柱中加入PE缓冲液，清洗离心柱；/n将空的离心柱放置入离心机中全速离心2min，并室温晾干；/n向离心柱中加入洗脱液，洗脱小片段DNA。/n
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