[发明专利]一种提高磷脂酰甘油合成反应活力的磷脂酶D固定化方法有效
申请号: | 201710092814.6 | 申请日: | 2017-02-21 |
公开(公告)号: | CN106947753B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 张小里;王姣;李冰麟;段丹丹;赵彬侠;董文博 | 申请(专利权)人: | 西北大学 |
主分类号: | C12N11/02 | 分类号: | C12N11/02;C12N9/16 |
代理公司: | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人: | 李婷;王孝明 |
地址: | 710069 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明提供了一种提高磷脂酰甘油合成反应活力的磷脂酶D固定化方法,该方法按照以下步骤进行:步骤一,将印迹底物加入到磷脂酶D溶液中进行配合,得到酶‑底物配合物溶液(印迹酶);步骤二,加入沉淀剂沉淀酶‑底物配合物,得到含有酶‑底物配合物聚集体混合溶液;步骤三,向沉淀后的混合溶液中加入水溶性交联剂进行交联反应,得到交联酶‑底物配合物聚集体;步骤四,对交联酶‑底物配合物聚集体进行洗涤,除去底物后得到交联印迹磷脂酶D聚集体。本发明的方法在磷脂酶D分子与底物分子印迹作用结束后,采用沉淀法“僵化”酶分子的这种“超活化”结构,再加入适当的水溶性交联剂对酶分子进行交联作用,实现了“超活化”结构酶分子的分子间交联和分子内交联,形成交联印迹磷脂酶D聚集体。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 磷脂 甘油 合成 反应 活力 磷脂酶 固定 方法 | ||
【主权项】:
一种提高磷脂酰甘油合成反应活力的磷脂酶D固定化方法,其特征在于,该方法按照以下步骤进行:步骤一,将印迹底物加入到磷脂酶D溶液中进行配合,得到酶‑底物配合物溶液;步骤二,加入沉淀剂沉淀酶‑底物配合物,得到含有酶‑底物配合物聚集体混合溶液;步骤三,向沉淀后的混合溶液中加入水溶性交联剂进行交联反应,得到交联酶‑底物配合物聚集体;步骤四,对交联酶‑底物配合物聚集体进行洗涤,除去底物后得到交联印迹磷脂酶D聚集体。
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