[发明专利]细菌性荚膜多糖的纯化方法有效
| 申请号： | 201710098943.6 | 申请日： | 2017-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN107043431B | 公开（公告）日： | 2020-06-30 |
| 发明（设计）人： | 祝先潮;陈春光 | 申请（专利权）人： | 上海瑞宙生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C08B37/00 | 分类号： | C08B37/00 |
| 代理公司： | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 201210 上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开细菌性荚膜多糖的纯化方法，灭活剂处理肺炎链球菌发酵培养液，加酸调节pH值≤6.5，沉淀杂质，离心和微滤去除沉淀物获得多糖澄清液；用截留分子量10—100KDa的膜对多糖澄清液进行超滤换液并浓缩，获得的荚膜多糖溶液组合使用复合型离子交换层析和羟基磷酸灰质盐层析进行色谱层析，获得纯化的荚膜多糖溶液；浓缩及超滤荚膜多糖溶液，并进行无菌过滤、保存。通过组合使用复合型离子交换层析和羟基磷酸灰质盐层析，可有效降低蛋白质及核酸杂质到低于1％，纯化的多糖产品质量高于欧盟药典标准要求，回收率在60％以上，本发明工艺简单快捷，容易放大进行工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 细菌性 荚膜 多糖 纯化 方法 | ||
【主权项】：
细菌性荚膜多糖的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)灭活剂处理肺炎链球菌发酵培养液，得到包含有细胞碎片、蛋白质、核酸和多糖的细菌溶解液；(2)在步骤(1)获得的细菌溶解液中加酸调节pH值≤6.5，沉淀杂质，离心和微滤去除沉淀物获得多糖澄清液；(3)用截留分子量10—100KDa的膜对步骤(2)获得的多糖澄清液进行超滤换液并浓缩，获得去除大部分可溶性蛋白质、核酸以及大颗粒杂质含量的荚膜多糖溶液；(4)将步骤(3)获得的荚膜多糖溶液组合使用复合型离子交换层析和羟基磷酸灰质盐层析进行色谱层析，获得纯化的荚膜多糖溶液；(5)浓缩及超滤步骤(4)获得的荚膜多糖溶液，并进行无菌过滤、保存。
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