[发明专利]一种基于纳米孔单分子技术的手性分子识别和对映体过量检测方法

摘要

本发明提供一种基于蛋白质纳米孔单分子技术的手性分子识别和对映体过量（ee）检测方法。该方法在α‑溶血素蛋白纳米孔内构建了具有双重识别单元的环糊精‑金属二元复合物作为适配体，该适配体与手性分子的不同异构体作用可产生不同特征的电流阻塞信号，由此实现对手性分子的识别和对映体过量（ee）的检测。该方法简单、快速、灵敏，不需要对手性分子进行衍生化，并可实现多种手性分子对映体的同时识别。

主权项

1.一种纳米孔单分子手性识别和对映体过量检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）在电解池顺式端加入α‑溶血素蛋白质，α‑溶血素蛋白质插于脂双层形成蛋白质纳米单通道；（2）在电解池反式端加入全（6‑脱氧‑6‑氨基）‑β‑ 环糊精和可溶性铜盐，在蛋白质纳米单通道内形成环糊精‑铜离子复合物；（3）在电解池顺式端加入待检测手性分子的不同异构体，记录加入手性分子前后单通道电流，D型与L型对映体在纳米孔内与环糊精‑铜离子复合物发生作用，产生不同的特征电流阻塞信号，从而实现手性分子对映体的区分；（4）测定D型与L型对映体混合物电流阻塞信号，统计D型与L型各自的特征事件数，由事件数计算得到对映体过量值。