[发明专利]一种利用荧光光谱监控酶法制备降血糖肽的方法

摘要

本发明公开了一种利用荧光光谱监控酶法制备降血糖肽的方法，包括如下步骤：(1)采集不同时间下酶解反应液的荧光光谱；(2)获取荧光光谱的峰位；(3)建立荧光光谱峰位与酶解蛋白液对α葡萄糖苷酶活性的抑制率的关系；(4)蛋白酶解液对α葡萄糖苷酶抑制率的实时监控。本发明通过采集降血糖肽的制备过程中荧光光谱，对其进行分析计算，能够得到酶解反应产物对α葡萄糖苷酶活性的制率，具有方便、速度快的优点。此外，在检测过程中，无需化学试剂，检测成本低，并且不会对环境造成污染，这些优点是湿化学检测方法无可比拟的，同时，能够提高工业化生产牡降血糖肽的质量，因而产品能够更好的降低糖尿患者的血糖浓度，提高了人们的健康水平，有极大的社会价值，同时也有巨大的经济价值。

主权项

一种利用荧光光谱监控酶法生产降血糖肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采集不同时间下酶解反应液的荧光光谱：使用荧光光谱仪获得酶解反应液的荧光光谱，设置激发波长280nm，发射波长300～500nm，在酶解反应的0～60min内选取若干时间节点对酶解反应液进行荧光光谱扫描；(2)获取荧光光谱的峰位：采用二次一阶多项式的1阶导数法方法，宽度为5～21点，计算出导数值为0时的波长值，即为荧光光谱的峰位；(3)建立荧光光谱峰位与酶解反应液对α葡萄糖苷酶活性的抑制率的关系：根据方程Y＝ax2+bx+c对数据进行拟合，获得参数a、b、c，其中Y是对α葡萄糖苷酶活性的抑制率，x是荧光光谱的峰位；(4)蛋白酶解液对α葡萄糖苷酶抑制率的实时监控：在酶解过程中，对酶解反应液进行荧光光谱扫描，获得荧光光谱，根据步骤(2)中的方法获得荧光光谱的峰位x，将峰位x代入步骤(3)所获的方程，计算得到酶解产物对α葡萄糖苷酶活性的抑制率。