[发明专利]一种磁珠法核酸提取方法在审
申请号: | 201710113885.X | 申请日: | 2017-02-28 |
公开(公告)号: | CN106591297A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 徐赛涛;吴勇聪;温小媛;陶瑞 | 申请(专利权)人: | 解码(上海)生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 上海硕力知识产权代理事务所31251 | 代理人: | 郭桂峰 |
地址: | 200120 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种磁珠法核酸提取方法,包括在生物样品中加入裂解缓冲液,裂解分离出生物样品中的核酸;核酸与裂解缓冲液中的纳米磁珠结合,在外部磁场作用下,形成磁珠‑核酸复合物;向磁珠‑核酸复合物中加入洗涤缓冲液,将磁珠‑核酸复合物中进行离心洗涤,去除磁珠‑核酸复合物上的杂质,收集洗涤后的磁珠‑核酸复合物;向洗涤后的磁珠‑核酸复合物中加入洗脱缓冲液,并加入去抑制剂;直接将磁珠‑核酸复合物和洗脱缓冲液的混合物进行后续的荧光定量PCR反应。本发明用离心代替磁力架吸附磁珠,将洗脱液和磁珠分离,根据不同种类的核酸可以设置不同的转速和时间,使洗脱液和磁珠彻底分开,提高提取的浓度和纯度。 | ||
搜索关键词: | 一种 磁珠法 核酸 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种磁珠法核酸提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、在生物样品中加入裂解缓冲液,裂解分离出所述生物样品中的核酸DNA/RNA;所述核酸DNA/RNA与所述裂解缓冲液中的纳米磁珠结合,在外部磁场作用下,形成磁珠‑核酸复合物;S2、向所述磁珠‑核酸复合物中加入洗涤缓冲液,在预设转速和预设时间下将所述磁珠‑核酸复合物中进行离心洗涤,去除磁珠‑核酸复合物上的杂质,收集洗涤后的磁珠‑核酸复合物;重复离心洗涤一次;S3、向所述洗涤后的磁珠‑核酸复合物中加入洗脱缓冲液,并加入去抑制剂;直接将磁珠‑核酸复合物和洗脱缓冲液的混合物进行后续的荧光定量PCR反应。
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