[发明专利]一种检测动物内脏中头孢菌素类药物残留的方法及其样品前处理方法

摘要

本发明公开了一种检测动物内脏中20种头孢菌素类药物残留的方法及其样品前处理方法。前处理方法包括：(1)取待检测样品，加入提取溶剂对所述待测样品进行提取；(2)离心得上清液；(3)取所述上清液加载到固相萃取小柱上净化，收集得第一流出液；(4)待第一流出液收集完毕，再取提取溶剂加载到所述固相萃取小柱上，收集得第二流出液，合并全部流出液；(5)将所述全部流出液经浓缩、复溶和过滤步骤，得到待测样液。本发明还公开了样品经前处理后通过液‑质联用检测头孢菌素残留的方法。该方法具有快速、高效、检出限低、重现性好的特点，适于对抗生素的痕量检测。

主权项

1.一种检测动物内脏中20种头孢菌素类药物残留的方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：所述20种头孢菌素类药物包括：头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢唑啉、头孢氨噻肟、头孢吡肟、头孢克肟、头孢克洛、头孢孟多锂、头孢拉定、头孢匹罗、头孢米诺、头孢哌酮、头孢尼西、头孢呋辛、头孢喹诺、头孢匹林、头孢噻呋、头孢洛宁、去乙酰基头孢匹林和脱呋喃甲酰基头孢噻呋；a.样品前处理：(1)取待检测样品，加入提取溶剂对所述待测样品进行提取，所述提取溶剂为乙腈和水的混合溶液；(2)离心，得上清液；(3)取上清液加载到固相萃取小柱上净化，收集得第一流出液；所述固相萃取小柱为PRiME HLB固相萃取小柱；(4)待第一流出液收集完毕，再取所述提取溶剂加载到所述固相萃取小柱上，收集得第二流出液，合并全部流出液；(5)将所述全部流出液经浓缩、复溶和过滤步骤，得到待测样液；其中，步骤(1)和步骤(4)中，所述提取溶剂为乙腈和水的混合溶液，乙腈和水的体积比为4:1‑6:1；步骤(3)中，所述待净化的上清液中所含样品的量与所述固相萃取中PRiME HLB填料的质量比为1.75:1‑2.25:1；b.采用超高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用仪对待测样液中含有的头孢菌素进行检测，所述高效液相色谱的检测条件为：色谱柱：Thermo Hypersil Gold C18 2.1×100mm，1.9μm；柱温：30℃；流动相A：甲醇，流动相B：含0.01％甲酸的5mmol/L醋酸铵水溶液；流速：0.20mL/min；进样量：10μL；洗脱方式：梯度洗脱；所述三重四级杆质谱的检测条件为：质量分析器：三重四级杆；离子源：ESI⁺；喷雾电压：4.5kV；鞘气流速：40arb；辅助气流速：10arb；毛细管温度：327℃；所述高效液相色谱的梯度洗脱程序为：