[发明专利]对咽拭子样本或鼻咽拭子直接实时定量的PCR的方法

摘要

本发明公开了对咽拭子样本或鼻咽拭子样本直接实时定量的PCR的方法，包括以下步骤(1)制备裂解液和PCR反应液；(2)将咽拭子样本或鼻咽拭子样本加入到含有步骤(1)中裂解液的PCR扩增管中，再加入磁珠到PCR扩增管中，振荡摇匀混合；(3)将步骤(2)中的PCR扩增管在80‑100℃高温处理10min后冷却到室温，然后在18‑28℃反应5‑10min；(4)将PCR扩增管瞬时离心后放入到磁力架中，待磁珠吸附到磁力架一侧后将上清吸出；(5)在PCR扩增管内加入配置好的PCR反应液，进行实时定量PCR反应；所述裂解液的成分为0‑2M的NaCl、0‑0.3％的Triton‑X和0‑0.2M的KCl，磁珠为市售的核酸提取使用的羟基磁珠，检测咽拭子样本不仅快速简便、高效实用，且不需核酸提取过程和离心机等设备，简化了操作过程，节约了时间和成本，能大量处理样本，操作检测时可防止污染。

主权项

对咽拭子样本或鼻咽拭子样本直接实时定量的PCR的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备裂解液和PCR反应液；(2)将咽拭子样本或鼻咽拭子样本加入到含有步骤(1)中裂解液的PCR扩增管中，再加入磁珠到PCR扩增管中，振荡摇匀混合；(3)将步骤(2)中的PCR扩增管在80‑100℃高温处理10min后冷却到室温，然后在18‑28℃反应5‑10min；(4)将PCR扩增管瞬时离心后放入到磁力架中，待磁珠吸附到磁力架一侧后将上清吸出；(5)在PCR扩增管内加入配置好的PCR反应液，进行实时定量PCR反应；所述步骤(1)中裂解液的成分为0‑2M的NaCl、0‑0.3％的Triton‑X和0‑0.2M的KCl。