[发明专利]多重实时荧光PCR检测Cr(VI)还原复合菌群六种功能基因的方法

摘要

本发明提供多重实时荧光PCR检测Cr(VI)还原复合菌群六种功能基因的方法，所述复合菌群包含保藏编号为CGMCC No.3052的Pannonibacter phragmitetus BB菌、保藏编号为ATCC No.700550的Shewanella oneidensis MR‑1菌和保藏编号为ATCC No.700007的Pseudomonas putida F1菌。所述六种功能基因为BB菌的Cr(VI)还原功能基因HcrR、MR‑1菌的Cr(VI)还原酶基因OmcA、F1菌的Cr(VI)还原酶基因ChrR，以及上述三种菌的16s rDNA基因。本发明提供了一种操作简单、快捷，成本低廉的多重荧光PCR技术检测六种功能基因表达动态变化的方法，检测方法灵敏性和特异性高，检测结果准确。

主权项

用于多重实时荧光PCR检测Cr(VI)还原复合菌群六种功能基因的引物组合，其特征在于，包括：用于扩增保藏编号为CGMCC No.3052的Pannonibacter phragmitetus BB菌的Cr(VI)还原功能基因HcrR及其核蛋白体核糖核酸16s亚基基因16s rDNA(BB)的引物，用于扩增保藏编号为ATCC No.700550的Shewanella oneidensis MR‑1菌的Cr(VI)还原酶基因OmcA及其核蛋白体核糖核酸16s亚基基因16s rDNA(MR‑1)的引物，用于扩增保藏编号为ATCC No.700007的Pseudomonas putida F1菌的Cr(VI)还原酶基因ChrR及其核蛋白体核糖核酸16s亚基基因16s rDNA(F1)的引物；引物序列如下：HcrR‑F：5'‑GGGACAACTACACCGCAGAC‑3'HcrR‑R：5'‑AGCCAGAGCGATGCCGAA‑3'OmcA‑F：5'‑ATTGGCTATGGCGGTAAGGTA‑3'OmcA‑R：5'‑AACAGATCGGCATTAGCAGGT‑3'ChrR‑F：5'‑CAAGCTCAATGACAAGACG‑3'ChrR‑R：5'‑GCCCTGTTCAACTTCACCCAT‑3'16s rDNA(BB)‑F：5'‑TTCACAACACGAGCTGACGA‑3'16s rDNA(BB)‑R：5'‑CAACGCGAAGAACCTTACCT‑3'16s rDNA(MR‑1)‑F：5'‑ACGTGCTACAATGGCGAGTA‑3'16s rDNA(MR‑1)‑R：5'‑TTCATGGAGTCGAGTTGCAG‑3'16s rDNA(F1)‑F：5'‑CGCGTGTGTGAAGAAGGTCT‑3'16s rDNA(F1)‑R：5'‑CACAGAGTTAGCCGGTGCTT‑3'。