[发明专利]一种诱导成体肝干细胞转化为高转移肝癌细胞的方法及相应细胞有效
申请号: | 201710126993.0 | 申请日: | 2017-03-06 |
公开(公告)号: | CN107513520B | 公开(公告)日: | 2021-02-19 |
发明(设计)人: | 刘超;施祥德;吴文睿;许磊波;余先焕;张锐 | 申请(专利权)人: | 刘超;施祥德;吴文睿;许磊波;余先焕;张锐;中山大学孙逸仙纪念医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫 |
地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种诱导成体肝干细胞转化为高转移肝癌细胞的方法及以此方法筛选出的稳定肝癌细胞,方法包括如下步骤:S1:对大鼠成体肝干细胞进行扩增、培养并保存;S2:采用基因转染技术将含有Notch1基因的慢病毒载体转入大鼠成体肝干细胞,获得稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞;S3:利用稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞,采用选择性条件培养法进行培养,使其在体外进一步分化,筛选出致瘤能力强及稳定的肝癌细胞;S4:采用筛选出的肝癌细胞,通过同种属的原位肝脏移植瘤模型,可在肝脏形成肝癌,并伴自发形成双肺转移瘤,从而获得高转移肝癌细胞。采用本发明的方法筛选出的稳定肝癌细胞成瘤时间短、致瘤性好、具有肺转移能力。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 成体 干细胞 转化 转移 肝癌 细胞 方法 相应 | ||
【主权项】:
一种诱导成体肝干细胞转化为高转移肝癌细胞的方法,其包括如下步骤:S1:对大鼠成体肝干细胞进行扩增、培养并保存;S2:采用基因转染技术将含有Notch1基因的慢病毒载体转入大鼠成体肝干细胞,获得稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞;S3:利用稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞,采用选择性条件培养法进行培养,使其在体外进一步分化,筛选出致瘤能力强及稳定的肝癌细胞;S4:采用筛选的肝癌细胞,通过同种属的原位肝脏移植瘤模型,可在肝脏形成肝癌,并伴自发形成双肺转移瘤,从而获得高转移肝癌细胞。
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