[发明专利]一种用米曲霉降解β‑胡萝卜素制备烟用香料的方法

摘要

本发明公开了一种用米曲霉降解β‑胡萝卜素制备烟用香料的方法。所述的米曲霉菌株分类命名为AspergillusoryzaeYNCA9804，保藏编号CCTCC NOM 2016654。将该菌株液体种子接种到添加β‑胡萝卜素储备液的培养基中进行发酵培养，发酵产物再经过滤除渣、减压浓缩后得到所需烟用香料。该香料具有浓郁果香味，添加到卷烟中进行评吸，具有丰富卷烟香气，降低喉部刺激性，改善余味的作用。本发明所用培养基简单，菌株性状稳定、易于保存、活化和发酵。生产工艺简单、操作性、规范性及可控性强，便于实现大规模工业化生产，具有良好的开发应用前景。

主权项

一种用米曲霉降解β‑胡萝卜素制备烟用香料的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将米曲霉菌株CCTCC：M2016654置于斜面固体培养基中保存备用；(2)β‑胡萝卜素储备液的制备：称取5gβ‑胡萝卜素，溶于10mL的二氯甲烷中，待β‑胡萝卜素彻底溶解后加入1g Tween‑80进行乳化；在避光条件下，将二氯甲烷彻底挥发干，再加入100mL无菌蒸馏水混合均匀，得储备液待用；(3)降解β‑胡萝卜素的产香发酵：①将保存备用的米曲霉菌株CCTCC：M2016654转接到液体种子培养基中，摇床上28℃培养24h，转速为180r/min，得米曲霉种子液；所述的液体种子培养基：NaNO3 2g/L，K2HPO4 1g/L，MgSO4.7H2O0.5g/L，KCL 0.5g/L，FeSO4.7H2O 0.01g/L，葡萄糖20g/L，pH值6.5～6.8，装入250mL锥形瓶，100mL/瓶，121℃，25min灭菌备用；②取步骤①所得米曲霉种子液，按培养基体积比1％接入50L发酵罐中进行液体培养，同时按培养基体积比0.1％～2％加入β‑胡萝卜素储备液，50L发酵罐定容30L；所述的培养基：NaNO3 2g/L，K2HPO4 1g/L，MgSO4.7H2O0.5g/L，KCL 0.5g/L，FeSO4.7H2O 0.01g/L，葡萄糖20g/L，pH值6.5～6.8；培养控制条件：温度25～40℃，通气比0.1～10，罐压：0.03～0.08MPa，DO≥20％，搅拌速率120～400r/min，发酵时间48h～192h；(4)发酵完成后过滤除渣，将上清液减压浓缩，即得所需烟用香料。