[发明专利]一种特异识别细菌脂多糖的广谱核酸适配体及其定向筛选方法

摘要

本发明提供一条能识别多种不同革兰氏阴性菌来源的脂多糖广谱性核酸适配体。该核酸适配体是基于免标记靶标分子、固定化核酸文库的capture‑SELEX技术基础上定向筛选获得的。即以鼠伤寒沙门氏菌脂多糖为唯一靶标，利用生物素‑亲和素作用将随机寡核苷酸文库通过生物素化的短互补链固定在亲和素包被的Fe3O4磁性纳米颗粒上，经过孵育、分离、扩增、酶切制备单链、克隆测序等步骤，当文库富集到一定程度后，再加入沙门氏菌和大肠杆菌完整的活性菌作为定向分子进行定向筛选，经过共15轮的反复筛选最终获得一条能识别四种脂多糖的广谱性核酸适配体。该核酸适配体能应用于饮用水、食品或临床医学等方面脂多糖的分析检测、分离富集和毒性中和等。

主权项

一条能识别鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、大肠杆菌及铜绿假单胞菌等不同细菌来源的脂多糖核酸适配体，其特征在于寡核苷酸适配子序列如序列表中序列1所示的序列。