[发明专利]氟乐灵半抗原及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了氟乐灵半抗原及其制备方法和应用，其具有如下结构式：其中，R为‑(CH₂)_n‑，n＝1‑4或‑CH＝CH‑或本发明的六种半抗原均是在氨基位点上衍生连接手臂，具有活性羧基，与载体蛋白偶联后能使机体产生效价高，能识别氟乐灵农药共有结构的特异抗体。本发明的半抗原化合物，不仅合成方法简便、纯度较高，而且能应用于合成适于动物免疫的抗原体系，弥补了国内氟乐灵免疫学检测方法技术领域的空白，为氟乐灵免疫检测方法的进一步发展奠定了基础。

主权项

1.一种氟乐灵半抗原的合成方法，其特征在于，所述氟乐灵半抗原具有如下结构式：半抗原结构为3c时，合成方法如下：将戊内酰胺溶于DMF，依次加入60%的氢化钠溶液和正溴丙烷，其中，戊内酰胺、氢化钠和正溴丙烷的摩尔比为：1:1.2:1.2，在氮气保护下，70℃油浴，搅拌反应；反应结束后，加水稀释，并加酸调节pH至2‑3，出现沉淀物，用乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋转蒸干溶剂，获得含酯基的仲胺中间体；向含酯基的仲胺中间体中加入37%盐酸和水，100℃油浴，冷凝回流进行水解，获得第二中间体；将4‑氯‑3,5‑二硝基三氟甲苯溶解于四氢呋喃，加入上述第二中间体、三乙胺和水，4‑氯‑3,5‑二硝基三氟甲苯与第二中间体的摩尔比为1:1.2，室温搅拌反应；反应完全后加水稀释，加稀盐酸酸化并用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋转蒸干溶剂，获得半抗原分子；半抗原结构为5c时，合成方法包括如下：将4‑溴巴豆酸乙酯溶于乙酸乙酯，将反应器置于冰‑甲醇中降温至‑15℃，用注射器缓慢加入正丙胺，4‑溴巴豆酸乙酯与正丙胺的摩尔比为1:3，常温搅拌反应， 反应结束后，乙酸乙酯萃取反应混合液，再用饱和氯化钠溶液洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸干溶剂，获得含酯基的仲胺中间体；将含酯基的仲胺中间体溶于四氢呋喃中，加入4‑氯‑3,5‑二硝基三氟甲苯和三乙胺，室温搅拌反应，4‑氯‑3,5‑二硝基三氟甲苯与含酯基的仲胺中间体的摩尔比为1:1.5；反应完全后加水稀释，加稀盐酸酸化并用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋转蒸干溶剂，残余物经柱层析分离纯化，旋转蒸干溶剂获得半抗原分子；半抗原结构为6c时，合成方法包括如下：将4‑溴甲基苯甲酸甲酯溶于乙酸乙酯，将反应器置于冰‑甲醇中降温至‑15℃，用注射器缓慢加入正丙胺，4‑溴甲基苯甲酸甲酯与正丙胺的摩尔比为1:2.5， 反应结束后，用乙酸乙酯萃取反应混合液，再用饱和氯化钠溶液洗涤，有机相合并，无水硫酸钠干燥，旋转蒸干溶剂，获得含酯基的仲胺中间体；将含酯基的仲胺中间体溶于四氢呋喃中，加入4‑氯‑3,5‑二硝基三氟甲苯和三乙胺，室温搅拌反应，4‑氯‑3,5‑二硝基三氟甲苯与含酯基的仲胺中间体的摩尔比为1:1.5；反应完全后加水稀释，加稀盐酸酸化并用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋转蒸干溶剂，残余物经柱层析分离纯化，旋转蒸干溶剂获得半抗原分子。