[发明专利]一种生长抑素28肽多克隆抗体及其制备方法

摘要

本发明公开了一种生长抑素28肽多克隆抗体及其制备方法。所述生长抑素28肽的多克隆抗体是将血蓝蛋白KLH作为载体蛋白进行羧基活化，再与生长抑素28肽中的氨基偶联，作为免疫抗原去免疫兔子，从兔子的血液中提取血清蛋白并纯化得到。所述纯化的方法为饱和硫酸铵沉淀法或辛酸‑硫酸铵法。所述生长抑素28肽多克隆抗体的效价达到1128000，特异性好、纯度高、制备方法简便，可以大量生产，在制备酶联免疫试剂盒以检测生长抑素类药物疫苗中生长抑素的定性检测上的应用前景广泛。

主权项

一种生长抑素28肽多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括具体步骤如下：S1.免疫抗原的制备：(1)将血蓝蛋白KLH和生长抑素28肽分别用PBS溶解，(2)在PBS溶解后的血蓝蛋白KLH溶液中加入碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺并调整pH为7～8，室温下反应15～30min，得到血蓝蛋白KLH处理液；(3)将PBS溶解后的生长抑素28肽溶液调整pH值为7～8，滴加血蓝蛋白KLH处理液中，在室温状态下搅拌反应1～3h，PBS透析，冷冻干燥后得到血蓝蛋白KLH‑生长抑素28肽固体粉末，并于‑20℃保存备用；(4)将血蓝蛋白KLH‑生长抑素28肽固体粉末用PBS溶解，制得免疫抗原；S2.免疫：先用免疫抗原和弗氏完全佐剂佐剂混合乳化后，采用颈部多点皮下注射免疫兔子，28天后用免疫抗原和弗氏不完全佐剂加强免疫，每隔14天后再加强免疫，共加强免疫四次；S3.抗体粗品的制备：在步骤S2中首次免疫28天后和加强免疫7天后分别对兔耳部静脉取血，所取血液均在4℃下静置16～24h，离心后取上清液为含有生长抑素28肽多克隆抗体的血清蛋白，即得生长抑素28肽多克隆抗体粗品；S4.将生长抑素28肽多克隆抗体粗品经提纯处理，得到生长抑素28肽多克隆抗体。