[发明专利]一种用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法和应用

摘要

本发明公开了一种用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法。该方法是以特定益生菌的完整细胞作为生物催化剂，以弱酸性磷酸盐缓冲液作为介质，以天然花青素提取物作为底物，构成生物转化花青素体系。本发明方法条件温和，底物与产物专一，显著简化后续纯化工序，是一种利用微生物对花青素生物转化原儿茶酸的简易策略，且发酵过程不加入其他有机物，降低了对环境的可能污染。转化目标产物的原儿茶酸含量最高可达33mg/L。本发明对体外研究微生物代谢转化花青素的机制具有重要的意义，也为天然花青素转化产物直接应用于益生菌发酵食品提供一种理论依据。

主权项

一种用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，包括以下具体步骤：S1.在花青素提取物的培养基中接种微生物培养后，转移微生物培养液至无菌离心管中，离心后弃尽上清，得沉淀为微生物菌体；S2.加入磷酸盐缓冲液到步骤S1的离心管中，重悬菌体沉淀，制成菌悬液；S3.花青素提取物用0.2μm微孔滤膜过滤除菌，将已除菌的花青素提取物添加到步骤S2的菌悬液中混合均匀，将菌悬液置于35～37℃静置培养；S4.将培养后的菌悬液离心后取出上清液，即为微生物催化天然花青素转化原儿茶酸；其中，所述的微生物为鼠李糖乳杆菌YYJP‑2(L.rhamnosus YYJP‑2)，该菌种于2016年11月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMC C60115；或干酪乳杆菌KFL2(L.casei KFL2)，该菌种于2016年11月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC60117。