[发明专利]检测PKLR基因突变的方法、试剂盒、寡核苷酸及其应用

摘要

本发明公开了一种检测常染色体隐性遗传病丙酮酸激酶缺乏症患者PKLR基因突变的引物和方法，其包括(i)扩增PKLR基因全外显子序列的引物；采用Sanger测序技术和测序引物。本发明可快速地将丙酮酸激酶缺乏症患者体内PKLR基因全外显子的突变检测出来。利用本发明完成的检测结果准确，可以辅助诊断丙酮酸激酶缺乏症，对早期干预、早期治疗和产前诊断有重要的参考意义。

主权项

一种检测PKLR基因突变的试剂盒，所述试剂盒包括检测体系PCR扩增反应液、测序体系反应液，其特征在于，所述检测体系PCR扩增反应液包括至少一对扩增引物，所述测序体系反应液包括一对测序引物M13F和M13R，所述至少一对扩增引物选自PKLR‑1F/PKLR‑1R、PKLR‑2F/PKLR‑2R、PKLR‑3‑4‑5F/PKLR‑3‑4‑5R、PKLR‑6‑7F/PKLR‑6‑7R、PKLR‑8‑9F/PKLR‑8‑9R、PKLR‑10F/PKLR‑10R，或PKLR‑11F/PKLR‑11R，其碱基序列为：PKLR‑1F：TGTAAAACGACGGCCAGTAGAGGAAATGCCAGGAGATGA；PKLR‑1R：AACAGCTATGACCATGTTCACCCTCATTTTCCTCCTAT；PKLR‑2F：TGTAAAACGACGGCCAGTAGAGGGTATGCTGAGAGACGAA；PKLR‑2R：AACAGCTATGACCATGAAGAAGCACCTCAAGAAATACCA；PKLR‑3‑4‑5F：TGTAAAACGACGGCCAGTGGGTTGCATCAGGGAATAAA；PKLR‑3‑4‑5R：AACAGCTATGACCATGGCCAAGGAGAAGGGAATGTG；PKLR‑6‑7F：TGTAAAACGACGGCCAGTGACTATGGGTGGGTCGTTTCT；PKLR‑6‑7R：AACAGCTATGACCATGCACCCACAGGTGTCCCTAAAA；PKLR‑8‑9F：TGTAAAACGACGGCCAGTGTGTGGGTGTCAGAGAAGTAGC；PKLR‑8‑9R：AACAGCTATGACCATGTGGCATTCTGTCTCTCCTGG；PKLR‑10F：TGTAAAACGACGGCCAGTGTGACACCTGGAACTGGAACA；PKLR‑10R：AACAGCTATGACCATGGACCACAGGAGAGAGGCAAG；PKLR‑11F：TGTAAAACGACGGCCAGTGCCAGGCTGGTCTCAAACT；PKLR‑11R：AACAGCTATGACCATGATGAGAATGGGAGACTGTGGA；M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT；M13R：AACAGCTATGACCATG。