[发明专利]诱导脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法有效
申请号: | 201710218934.6 | 申请日: | 2017-04-05 |
公开(公告)号: | CN106834223B | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
发明(设计)人: | 颜学恒;薛宜青;熊延狮;张智培;苏恩筠 | 申请(专利权)人: | 上海逍鹏生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 上海远同律师事务所 31307 | 代理人: | 张坚 |
地址: | 201108 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种诱导脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法,该方法包括接种、悬滴培养以及加入分化培养基悬滴培养三个步骤,一方面利用了三维培养和控制细胞数量和密度的方式实现间充质干细胞的定性定量分化,可以在较短时间内获得品质受到管控的软骨细胞团,另一方面本发明采用了悬滴培养方式,无需贴壁,不需要使用血清,更不需要震荡培养或者额外的载体,可以大大降低细胞的损伤和污染。 | ||
搜索关键词: | 诱导 脐带 间充质 干细胞 软骨 细胞 分化 方法 | ||
【主权项】:
一种诱导脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:步骤1)接种:经分散成单个细胞的脐带来源的间充质干细胞悬浮于DMEM高糖培养基中形成细胞溶液,再将所述细胞溶液以250个/μL~2500个/μL的细胞浓度,滴在培养板上;步骤2)悬滴培养:将所述培养板倒置进行悬滴培养24h~48h,获得成簇种子细胞团;步骤3)加入分化培养基进行悬滴培养:吸除所述培养板上的DMEM高糖培养基,加入软骨分化培养基,继续倒置所述培养板进行悬滴培养获得软骨细胞团。
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