[发明专利]一种抑制芸苔属植物花柱NADPH氧化酶基因表达的方法在审
申请号: | 201710224342.5 | 申请日: | 2017-04-07 |
公开(公告)号: | CN107267507A | 公开(公告)日: | 2017-10-20 |
发明(设计)人: | 王春雷;黄旭;宋平平;孙娅;刘正阳;张盼盼 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/90 |
代理公司: | 南京钟山专利代理有限公司32252 | 代理人: | 戴朝荣 |
地址: | 225009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种抑制芸苔属植物花柱NADPH氧化酶基因表达的方法。利用已知的NADPH氧化酶基因(Genbank登陆号XM_009114548.2)在其二级结构的可能结合位点处设计出互补核苷酸链,添加至培养基中。将芸苔属植物花柱放入培养基中培养4小时,让其充分吸收互补核苷酸链。提取花柱RNA,反转录成cDNA后,通过荧光定量PCR检测出花柱中NADPH氧化酶基因表达量显著减少,证明该互补核苷酸链可以抑制该基因表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 抑制 芸苔属 植物 花柱 nadph 氧化酶 基因 表达 方法 | ||
【主权项】:
一种抑制芸苔属植物花柱NADPH氧化酶基因表达的方法,其特征在于:包含以下步骤:1)互补核苷酸链和引物合成:根据目的基因的序列,设计荧光定量PCR引物;并根据其二级结构,在其茎环处设计一段互补核苷酸链;所述目的基因为NADPH氧化酶基因;2)培养基配置:10%MS培养基、1.0%琼脂糖、80mM蔗糖,加入互补核苷酸链,使其终浓度达到400μM;3)花柱培养:将芸苔属植物花柱切下,放入培养基中培养,4小时后,提取其花柱RNA,并反转录成cDNA。4)基因表达量测定:将反转录的cDNA作为模板,通过荧光定量PCR测定其NADPH氧化酶基因表达量。
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