[发明专利]一种鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量测定的方法

摘要

本发明涉及一种鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量测定的方法。本发明鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的测定方法包括：样品制备；样品前处理；有机溶剂提取；固相萃取柱去除色素杂质，氮气吹至近干，以流动相溶解残渣，溶液经滤膜过滤供UPLC‑TQD分析；标准溶液的配制；高效液相色谱‑串联质谱仪测定、等过程。本发明的方法，操作简单，快速，自动化程度高，萃取效率快，回收率和重复性好，可实现鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的同时测定。

主权项

1.一种鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量测定的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)样品制备：将鸡蛋样品绞碎、匀浆，冷冻保存；(2)样品前处理：准确称取经步骤(1)匀浆均匀的鸡蛋样品2g，置于50mL聚丙烯离心管中，加入5mL乙腈作为粗提取液，均质1min后，振荡10min，在4℃，以8000r/min离心，提取上清液于鸡心瓶中，得提取液；沉淀物用5mL乙腈重复提取1次，合并两次提取液，加入2mL异丙醇，于旋转蒸发仪50℃浓缩至近干，得浓缩液；浓缩液中加入2.0mL甲醇+与二氯甲烷的混合溶液溶解残渣，混匀，得待净化溶液；将固相萃取柱依次用5mL的甲醇、5mL甲醇+二氯甲烷的混合溶液预淋洗、条件化，当溶剂液面到达固相萃取柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5mL的甲醇+二氯甲烷的混合溶液冲洗烧杯后，洗脱固相萃取柱，并重复一次；将盛有10mL洗脱液的刻度离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮气吹干，用乙腈+超纯水的混合溶液定容至1.0mL，在旋涡混合器上混匀，经0.22μm有机滤膜过滤，供高效液相色谱‑串联质谱仪测定；所述甲醇+二氯甲烷的混合溶液中甲醇与二氯甲烷体积比为1：99；所述乙腈+超纯水的混合溶液中乙腈与超纯水体积比为1：1；步骤(2)所述固相萃取柱为自制的中性氧化铝柱，是以中性氧化铝粉末为固相萃取填料，固相萃取柱中，中性氧化铝粉末的加入量为每克样品加入1克中性氧化铝粉末；所述中性氧化铝粉末在使用前，于马弗炉内400℃下烘干；(3)标准溶液的配制：混合标准工作液用乙腈稀释，配制成具有系列梯度浓度的混合标准工作液，以乙腈+超纯水混合溶液定容；所述乙腈+超纯水的混合溶液中乙腈与超纯水体积比为1：1；(4)高效液相色谱‑串联质谱仪测定：将工作液注入配有三重四级杆的高效液相色谱‑串联质谱仪仪器中，进行超高效液相色谱‑串联质谱测定；超高效液相色谱测定条件如下：UPLC ACQUITY BEHC18柱，50×2.1mm，1.7μm；流动相A为乙腈，流动相B为5mmol/L的乙酸铵溶液；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL；所采用的流动相梯度及时间条件如下：流动时间：0min、0.50min、3.00min、3.10min、5.00min，流动相梯度依次是，流动相A：20％、20％、80％、20％、20％，流动相B：80％、80％、20％、80％、80％；质谱条件如下：离子源：ESI，负离子模式；毛细管电压：4.0kv；离子源温度：110℃；脱溶剂气温度350℃；脱溶剂气流量：800L/hr；锥孔反吹气流量50L/hr；锥孔电压：40v；扫描方式：多反应监测(MRM)；其中，所采用的监测离子对、锥孔电压和碰撞能量条件具体如下：a.氟虫腈：母离子434.8，定量碎片离子250.0，锥孔电压‑35v，碰撞能量‑25v；母离子434.8，子离子330.0，锥孔电压‑35，碰撞能量‑15v；b.氟甲腈：母离子386.9，定量碎片离子351.0，锥孔电压‑30v，碰撞能量‑15v；母离子386.9，子离子282.0，锥孔电压‑30v，碰撞能量‑30v；c.氟虫腈砜：母离子450.9，定量碎片离子282.0，锥孔电压‑35v，碰撞能量‑25v；母离子450.9，子离子415.0，锥孔电压‑35v，碰撞能量‑15v；d.氟虫腈亚砜：母离子418.9，定量碎片离子262.0，锥孔电压‑30v，碰撞能量‑25v；母离子418.9，子离子314.0，锥孔电压‑30v，碰撞能量‑20v；(5)残留量测定结果的计算：以保留时间对氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈亚砜四种农药进行定性分析，以峰面积进行四种农药的定量分析，用外标法计算结果。