[发明专利]一种脱细胞羊膜粉的制备方法

摘要

本发明公开了一种脱细胞羊膜粉的制备方法，包括1)、将羊膜清洗、剪碎；2)、在4℃的振荡器中洗涤12～24小时；3)、在4℃的振荡器中用1％的Triton x‑100和氢氧化铵洗涤1～3天；4)、在4℃的振荡器中用去离子水洗涤12～24小时；然后用PBS洗涤12～24小时；5)、‑80℃保存24小时，然后冻干；6)、低温环境下研磨成粉7)、消毒后‑80℃储存。本发明采用相对温和的脱细胞方法去除了羊膜的细胞并进行灭菌处理，整个过程中严格控制低温环境，对羊膜中的活性物质进行有效的保护；所制得的冷冻羊膜粉末可以制成羊膜胶或喷雾等多种形式，更有利于创面利用胶原与蛋白小分子，为创面愈合提供更有效的营养支持，其生长因子等活性物质可持续促上皮化。

主权项

一种脱细胞羊膜粉的制备方法,其特征在于，包括以下步骤：1)、将新鲜的羊膜清洗，去除表面血迹，剪成碎片；2)、在4℃的振荡器中用去离子水洗涤12～24小时,每4～6小时更换一次去离子水；3)、在4℃的振荡器中用质量分数为0.1～2％的Triton X‑100和氢氧化铵混合液洗涤1～3天，每天更换洗涤液；4)、在4℃的振荡器中用去离子水洗涤12～24小时,每4～6小时更换一次去离子水；然后用PBS洗涤12～24小时，每4～6小时更换PBS；5)、‑80℃保存24小时后冻干，将泥浆状支架置于一次性无菌平皿中，注意无菌操作，转移至冻干机冷阱中预冷，开启真空，按照预设的冻干工艺冻干，无菌收料。6)、将冻干后的羊膜碎片放入钢桶中浸入液氮中预冷后，钢桶放入冷冻研磨机中研磨成粉；7)、将羊膜粉辐照灭菌后‑80℃储存备用。