[发明专利]一种GyV8型环形病毒VP3可溶性蛋白的制备方法在审
申请号: | 201710248360.7 | 申请日: | 2017-04-17 |
公开(公告)号: | CN106995486A | 公开(公告)日: | 2017-08-01 |
发明(设计)人: | 叶建强;刘敏;邵红霞;秦爱建;季星妤;施洋洋;韦芊含 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C07K14/01 | 分类号: | C07K14/01;C12N15/70;C12N15/64;C07K16/08;C12R1/19 |
代理公司: | 南京知识律师事务所32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种GyV8新型环形病毒VP3可溶性蛋白的制备方法。该方法是用pGEX‑6p‑1线性化载体以及GyV8病毒VP3基因片段的引物,利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆VP3,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、实现GyV8的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明不依赖于酶切位点及限制性内切酶的重组酶ExnaseTM II体外重组技术克隆GyV8病毒VP3基因,简化克隆过程,实现VP3基因快速克隆表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 gyv8 环形 病毒 vp3 可溶性 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种GyV8型环形病毒VP3可溶性蛋白的制备方法,其特征在于,利用pGEX‑6p‑1线性化载体以及GyV8病毒VP3基因片段的引物,利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆VP3,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、实现GyV8的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的VP3可溶性蛋白。
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