[发明专利]一种用于TNF‑α检测的半定量核酸适配体试纸条及其制备方法

摘要

本发明公开了一种用于TNF‑α检测的半定量核酸适配体试纸条，所述试纸条包括支撑底板，底板上依次铺展的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜以及吸水纸；所述适配体经SELEX方法筛选得出；所述方法在硝酸纤维素膜上设有检测线，检测线上包被有链霉亲和素，结合垫上为适配体纳米金交联复合物。根据TNF‑α和其适配体特异性结合的原理，在硝酸纤维膜上检测线的颜色深浅随着TNF‑α含量的不同而发生变化，从而用以检测TNF‑α。本发明可用于老年痴呆的早期筛查，方法操作简便，核酸适配体无需标记，无需使用大型的仪器设备，具有检测速度快、灵敏度高等优点。

主权项

一种用于TNF‑α检测的半定量核酸适配体试纸条，其特征在于，包括两端分别设有样品垫(2)和吸水垫(5)的底板(1)，底板(1)的中部设置有硝酸纤维素膜检测层(4)；硝酸纤维素膜检测层(4)上靠近吸水垫(5)的一端设有检测线(6)，检测线(6)包被有特异性结合生物素的链霉亲和素；在硝酸纤维素膜检测层(4)和样品垫(2)之间设置有结合垫(3)，结合垫(3)上掺有适配体纳米金复合物；样品垫(2)、结合垫(3)、硝酸纤维素膜(4)和吸水垫(5)依次搭接；所述的适配体纳米金复合物是不能通过硝酸纤维素膜检测层的核酸‑适配体‑纳米金网格状复合物，其中核酸连接在纳米金颗粒上并杂交形成双链，适配体能够与TNF‑α特异性识别，在识别后打开双链，使核酸‑适配体‑纳米金网格状复合物分解；纳米金颗粒上还连接有末端设有生物素的单链核酸，其在适配体纳米金复合物分解后能通过硝酸纤维素膜检测层，并泳动到检测线处。