[发明专利]一种H9C2心肌细胞培养液诱导iPSCs定向心肌分化的方法

摘要

本发明公开一种H9C2心肌细胞培养液诱导iPSCs定向心肌分化的方法，属于医药技术领域。该方法是将去除了LIF的常规iPSCs细胞培养液和H9C2心肌细胞培养液混合后培养iPSCs。本发明证实H9C2心肌细胞培养液可有效诱导iPSCs心肌定向分化。促进多向分化潜能基因OCT‑4荧光猝灭，细胞免疫荧光实验证实可提高心肌α‑横纹肌辅肌动蛋白(α‑actinin)表达，qPCR结果表明β‑MHC、GATA4、Mef2C、NCX‑1等mRNA表达显著增加。

主权项

1.一种H9C2心肌细胞培养液诱导iPSCs定向心肌分化的方法，其特征在于包括如下步骤：将去除了LIF的常规iPSCs细胞培养液和H9C2心肌细胞培养液混合后培养iPSCs；所述的常规iPSCs细胞培养液的成分为80% DMEM、15%胎牛血清、1%谷氨酰胺、1%非必须氨基酸、1%核苷、1000U/mL LIF、0.25% 巯基乙醇、1%双抗；所述的H9C2心肌细胞培养液，是将H9C2心肌细胞在含15%FBS、50U/mL青霉素及10μg/mL 链霉素的DMEM培养液中常规培养3d，传代前吸取培养液过滤；所述的iPSCs为鼠源iPSCs。