[发明专利]一种快速高效的白桦转基因方法

摘要

一种快速高效的白桦转基因方法，它涉及一种植物转基因的方法。本发明的目的是要解决现有白桦稳定转化效率低和转化周期太长的问题。本发明的方案为选取苗高为5～6cm的白桦组培苗，诱导培养愈伤组织；转移至含目的基因序列的根癌农杆菌侵染液中，抽真空处理后，暗培养；进行抗性苗筛选，将筛选的抗性苗转移到加选择剂和抑菌剂的生根培养基中培养，分子检测验证成功后，即完成。与现有技术相比，平均转化率提高了2.71倍。且用愈伤组织侵染转化周期比用叶片和茎为外植体转化周期缩短1/3以上。本发明应用转基因领域。

主权项

一种快速高效的白桦转基因方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：一、选取苗高为5～6cm的白桦组培苗，在超净工作台中将外植体叶片和茎段置于愈伤诱导培养基中，诱导培养7～10天；二、将步骤一在愈伤诱导培养基中生长的愈伤组织取出，转移至含目的基因序列的根癌农杆菌侵染液中，用真空泵中抽真空5～10min后，置于共培养的培养基上，黑暗处理48h；其中，侵染液OD600为0.6～0.8，三、将步骤二黑暗处理后的愈伤组织置于加入抑菌剂的转基因抗性筛选培养基上于25℃光照条件下进行筛选培养40～50天，得到白桦抗性苗；四、将步骤三的白桦抗性苗转移到加选择剂和抑菌剂的生根培养基中培养37～42天后，进行分子检测验证，检测验证正确后，即表明获得转基因白桦苗。