[发明专利]一种短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌三菌复合微粒子的制备方法及应用

摘要

一种短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌三菌复合微粒子的制备方法及应用，它涉及一种短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌三菌复合微粒子的制备方法及应用。本发明的目的是为了解决益生菌易受胃液、肠液、胆汁的破坏，使活菌数降低，影响保健效果的问题，本发明方法为：短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌菌体离心弃上清，沉淀并定容，再加入果胶溶液然后滴入CaCl2溶液中，得到的湿微粒子，静止固化，过滤，冲洗微粒子表面，然后与冻干保护剂混合均匀，冷冻干燥。本发明可作为降脂产品进行应用。本发明利用果胶包裹益生菌使心材免受贮藏环境及胃液、肠液和胆汁破坏，使活菌经过胃肠道时得到保护。本发明应用于益生菌领域。

主权项

一种短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌三菌复合微粒子的制备方法，其特征在于该制备方法按以下步骤实现：一、将活化的植物乳杆菌接种到MRS液体培养基中，在37℃下富集培养48h，得到植物乳杆菌培养液；将活化的发酵乳杆菌接种到MRS液体培养基中，在厌氧条件37℃下富集培养24h，得到发酵乳杆菌培养液；将活化的短双歧杆菌接种到MRS+L‑半胱氨酸盐酸盐的液体培养基中，在厌氧条件37℃下富集培养48h，得到短双歧杆菌培养液；将得到的三种菌种培养液分别离心、去上清，得到短双歧杆菌的菌体沉淀、发酵乳杆菌的菌体沉淀和植物乳杆菌的菌体沉淀；二、将短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌的菌体沉淀等质量混合，然后用无菌生理盐水定容至5mL，得到复合浓缩菌液；三、将果胶溶液等体积加入到复合浓缩菌液中，并在漩涡振荡器上振荡至混合均匀，得到混合液；用注射器吸取混合液，通过针头将混合液滴入浓度为100‑500mmol/L的无菌CaCl2溶液中，得到湿的微粒子；四、将湿的微粒子置于4℃冰箱静止固化0.5‑4h，然后过滤，再用无菌水冲洗胶囊表面，得到冲洗后的微粒子；五、将冲洗后的微粒子与冻干保护剂按照质量体积比为(1‑5)g:(1‑8)mL的比例混合均匀，然后放入‑20℃的冰箱预冻2h，再用真空冷冻干燥机进行冷冻干燥，制得短双歧杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌三菌复合微粒子。