[发明专利]一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒。该试剂盒包括组分甲和/或组分乙；组分甲包括封闭序列甲和引物对甲；组分乙包括封闭序列乙和引物对乙；封闭序列甲和封闭序列乙均为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；引物对甲由上游引物F1和下游引物R1组成；引物对乙由上游引物F2和下游引物R2组成；封闭序列甲、上游引物F1、下游引物R1、封闭序列乙、上游引物F2和下游引物R2的核苷酸序列依次如序列表中的序列2、序列3、序列4、序列6、序列7和序列8所示。实验表明，采用本发明提供的试剂盒检测人类KRAS基因突变，准确率高，灵敏度也较高，从而大大的降低了检测的假阴性率，具有重要的应用价值。

主权项

一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒，包括组分甲和/或组分乙；所述组分甲包括封闭序列甲和引物对甲；所述封闭序列甲为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；所述引物对甲由用于扩增特异DNA片段甲的两条引物组成；所述特异DNA片段甲中具有靶序列甲；所述靶序列甲为人类基因组中上游引物F1和下游引物R1组成的引物对甲的靶序列；所述上游引物F1为如下a1)或a2)：a1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；a2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述下游引物R1为如下a3)或a4)：a3)序列表的序列4所示的单链DNA分子；a4)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；所述封闭序列甲和所述靶序列甲满足如下关系(c1)或(c2)或(c3)或(c4)或(c5)或(c6)：(c1)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的一条链中的50个以上连续核苷酸相同；(c2)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的正义链中的50个以上连续核苷酸相同；(c3)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的反义链中的50个以上连续核苷酸相同；(c4)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的一条链相同；(c5)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的正义链相同；(c6)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的反义链相同；所述组分乙包括封闭序列乙和引物对乙；所述封闭序列乙为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；所述引物对乙由用于扩增特异DNA片段乙的两条引物组成；所述特异DNA片段乙中具有靶序列乙；所述靶序列乙为人类基因组中上游引物F2和下游引物R2组成的引物对乙的靶序列；所述上游引物F2为如下a5)或a6)：a5)序列表的序列7所示的单链DNA分子；a6)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；所述下游引物R2为如下a7)或a8)：a7)序列表的序列8所示的单链DNA分子；a8)将序列8经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列8具有相同功能的DNA分子；所述封闭序列乙和所述靶序列乙满足如下关系(d1)或(d2)或(d3)或(d4)或(d5)或(d6)：(d1)所述封闭序列乙和所述靶序列乙的一条链中的50个以上连续核苷酸相同；(d2)所述封闭序列乙和所述靶序列乙的正义链中的50个以上连续核苷酸相同；(d3)所述封闭序列乙和所述靶序列乙的反义链中的50个以上连续核苷酸相同；(d4)所述封闭序列乙和所述靶序列乙的一条链相同；(d5)所述封闭序列乙和所述靶序列乙的正义链相同；(d6)所述封闭序列乙和所述靶序列乙的反义链相同。