[发明专利]一种人血白蛋白的制备方法

摘要

本发明涉及一种生物制品技术中蛋白质的分离、提取方法，具体涉及人血白蛋白的制备方法，依次进行以下步骤制得，分离组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ、分离组分Ⅳ、分离组分Ⅴ、精制纯化；超滤、巴氏灭活、除菌灌装，检定成品，将检定合格后产品贴签、装盒等进行包装。本发明采用相对温和的加压过滤分离方法，对蛋白质分子结构无影响，确保了制备出高质量的人血白蛋白；大大提高了产品收率，并能够向临床提供低铝离子含量甚至不含铝离子的人血白蛋白，提高了人血白蛋白的质量。

主权项

人血白蛋白的制备方法，包括以下步骤：第一步，分离组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ：将低温冰冻人血浆融化为液体状态，加入药用乙醇，至最终乙醇的体积达到人血浆和药用乙醇混合液总体积的22％，同时用1mol/L醋酸溶液调节人血浆和药用乙醇混合液的pH至6.4～6.6，并调节血浆蛋白质使其质量分数达到5.5％，调控温度至－5.5℃，搅拌2小时以上，静置4小时以上后，往混合液中按25g/L加入硅藻土或珍珠岩或二者组合作为助滤剂，采用加压过滤分离方法分离组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀；第二步，分离组分Ⅳ：将第一步收集的压滤上清液，用1mol/L醋酸溶液调节pH至6.2～6.4，加入药用乙醇至乙醇的体积达到第一步收集的压滤上清液和药用乙醇混合液总体积的40％，调控温度至－5℃，搅拌2小时以上，静置6小时以上，往混合液中按20g/L加入硅藻土或珍珠岩或二者组合作为助滤剂，采用加压过滤分离方法分离组分Ⅳ沉淀；第三步：分离组分Ⅴ：将第二步收集的压滤上清液，用pH为4.0的缓冲液调节pH至4.9～4.95，加入药用乙醇至上一步收集的压滤上清液和药用乙醇混合液总体积的40％，调控温度至－9℃，搅拌2小时以上，静置8小时以上，采用加压过滤分离方法分离组分Ⅴ沉淀；第四步：精制纯化，采用用pH4.0缓冲液调节组分Ⅴ沉淀的pH 4.60～4.70，调控温度至－2～－3℃，静置4小时以上，深层过滤，收集过滤液进入下一工序；第五步，超滤：将上一工序深层过滤液的用1mol/LNaHCO3溶液调整滤过液pH为6.8～7.0，再浓缩深层过滤液至蛋白质含量22％以上，收集超浓缩液进入下一步工序；第六步，巴氏灭活：将上一步超滤浓缩液调pH 7.0～7.2，添加辛酸钠，至每克蛋白质中添加0.14～0.18克辛酸钠，60±0.5℃水浴保温10小时。第七步，除菌灌装，检定成品，将检定合格后产品贴签、装盒等进行包装。