[发明专利]一种分子SSR标记技术在审

专利信息
申请号: 201710313764.X 申请日: 2017-05-05
公开(公告)号: CN107058553A 公开(公告)日: 2017-08-18
发明(设计)人: 李泽卿;喻超 申请(专利权)人: 武汉爱基百客生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/10
代理公司: 上海精晟知识产权代理有限公司31253 代理人: 冯子玲
地址: 430000 湖北省武汉市东湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种分子SSR标记技术,包括如下步骤对所需标记的分子进行基因组DNA提取,且基因组DNA提取在35‑50摄氏度的密封条件下进行,选取分子标记所需要的多种引物,在45‑60摄氏度的条件下滴加催化剂,且边滴加边对其进行搅拌,从而分子标记所需的引物进行合成,将处理后的基因组DNA提取置于35‑50摄氏度的条件下,将上述处理完成的PCR扩增产物进行纯化,然后用65‑75%乙醇洗涤一次后,放干后再用无菌水或者TE溶解,然后将PCR扩增产物片段扫描准备,PCR扩增产物上机基因扫描。该能够改变传统的分子标记方法,加快分子标记的进步进程,推动科技成果的转化,促进种子创新工程的发展。
搜索关键词: 一种 分子 ssr 标记 技术
【主权项】:
一种分子SSR标记技术,其特征在于,包括如下步骤:A、对所需标记的分子进行基因组DNA提取,且基因组DNA提取在35‑50摄氏度的密封条件下进行;B、选取分子标记所需要的多种引物,并将多种引物放置到透明反应器中,在45‑60摄氏度的条件下滴加催化剂,且边滴加边对其进行搅拌,从而分子标记所需的引物进行合成;C、将A中处理后的基因组DNA提取置于35‑50摄氏度的条件下,然后通入合成的引物,且引物在30‑45s内完成,从而对片段PCR进行扩增,PCR反应分为两个阶段,首先寡核苷酸引物在低严谨条件下与模板DNA退火,此时发生了一些合成,以便稳定模板与引物之间相互作用,然后进行高严谨退火条件的循环,两个位点间那些序列在低严谨度退火条件下发生的引物延伸可继续在高严谨条件下扩增;D、将上述处理完成的PCR扩增产物进行纯化,PCR产物加入2倍体积的乙醇中,在20‑30摄氏度的条件下沉淀过夜后低速短暂离心,弃掉上清,然后用65‑75%乙醇洗涤一次后,弃掉乙醇,放干后再用无菌水或者TE溶解;E、然后将PCR扩增产物片段扫描准备;F、PCR扩增产物上机基因扫描;G、生物信息学分析。
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