[发明专利]一种利用双功能融合酶Lip-EG1CD进行废纸脱墨的方法

摘要

本发明公开了一种利用双功能融合酶Lip‑EG1CD进行废纸脱墨的方法，包括：废纸预处理，采用双功能融合酶脱墨处理，以及收集纸浆；其中，双功能融合酶为含内切型纤维素酶和脂肪酶活性的双功能融合酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1 所示。本发明将内切型纤维素酶和脂肪酶通过linkers连接起来，构建出含内切型纤维素酶和脂肪酶活性的双功能融合酶，具有较好的热稳定性、pH耐受性，是一种工业化应用的优质酶源。可以在中性条件下同时协同发挥二种酶的脱墨作用，可以降低酶成本，提高脱墨效率，在工业化应用中具有良好的应用前景。

主权项

1.一种利用双功能融合酶Lip-EG1CD进行废纸脱墨的方法，其特征在于，在废纸脱墨中使用的酶为双功能融合酶Lip-EG1CD，所述的双功能融合酶Lip-EG1CD为含内切型纤维素酶和脂肪酶活性的双功能融合酶Lip-EG1CD，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；包括以下步骤：1)把废纸撕碎后放入5％浆浓的水桶里，常温浸泡，用ZQS 2打浆机疏解纸张，然后把纸浆用离心机甩干、分散纸浆、测浆料水分后储存于4℃条件下；2)在反应容器中加入100mM pH 7.5磷酸钠缓冲液、水、纸浆、0.3％AEO-9、双功能融合酶，200rpm，35℃～55℃恒温震荡反应，反应结束后沸水灭活5min终止反应，取浆液用于测发色基团和还原糖释放量；3)转移反应体系至浮选池，加入CaCl2、0.3％AEO-9和水，浮选10min，之后用自来水冲洗并用60目筛收集纸浆。