[发明专利]小麦矮腥黑粉菌原生质体的制备方法在审
| 申请号： | 201710328722.3 | 申请日： | 2017-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN107058132A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 高利;沈慧敏;陈万权;刘太国;刘博 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司11129 | 代理人： | 高芬芳 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种小麦矮腥黑粉菌原生质体的制备方法，包括如下步骤(1)菌丝培养在土壤浸提液培养基上培养小麦矮腥黑粉菌冬孢子，待冬孢子萌发后转接到T19液体培养基中振荡培养，在土壤浸提液培养基上培养的天数与在T19液体培养基中振荡培养的天数总共为40～50天，收集菌丝体；(2)细胞壁裂解以KCl溶液作为渗透压稳定剂，配制混合酶液，加入到菌丝体中，28℃振荡酶解2～3小时，即得到小麦矮腥黑粉菌原生质体；所述混合酶液包括质量百分比浓度为1.5％的崩溃酶、1.5％的溶壁酶和1.5％的蜗牛酶。采用该方法制备小麦矮腥黑粉菌原生质体，产量高达12.0×105个/mL，且释放的原生质体均匀散乱分布，不聚集成堆。 | ||
| 搜索关键词： | 小麦 矮腥黑粉菌 原生 质体 制备 方法 | ||
【主权项】：
小麦矮腥黑粉菌原生质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)菌丝培养：在土壤浸提液培养基上培养小麦矮腥黑粉菌冬孢子，待冬孢子萌发后转接到T19液体培养基中振荡培养，在土壤浸提液培养基上培养的天数与在T19液体培养基中振荡培养的天数总共为40～50天，收集菌丝体；(2)细胞壁裂解：以KCl溶液作为渗透压稳定剂，配制混合酶液，加入到菌丝体中，28℃振荡酶解2～3小时，即得到小麦矮腥黑粉菌原生质体；所述混合酶液包括质量百分比浓度为1.5％的崩溃酶、1.5％的溶壁酶和1.5％的蜗牛酶。
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