[发明专利]一种携载抗肿瘤药物连接CD22单抗靶向淋巴瘤的血小板靶向载药体系的制备方法

摘要

本发明公开了一种靶向淋巴瘤的携载CD22单抗及抗肿瘤药物的血小板载药体系的制备方法，首先将全血抗凝、离心制得的血小板丰富血浆深度离心和洗涤，获得洗涤血小板，经MBS试剂处理其表面修饰有指向巯基的马来酰亚胺基团，后与经Traut’s试剂巯基化的抗CD22单抗反应，得到连接CD22单抗靶向淋巴瘤细胞的血小板。接着将上述血小板与抗肿瘤药物混合孵育，经离心、分散，最终得到目标载药体系。该载药体系具有来源广、载药率高、生物相容性好、靶向主动精准、循环时间长等优势，可增加药物的抗肿瘤效应，同时降低对正常组织的毒性，从而减轻化疗药物的毒副作用，对提高淋巴瘤患者生活质量和医疗质量具有重要意义。

主权项

一种携载抗肿瘤药物连接CD22单抗靶向淋巴瘤的血小板靶向载药体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)环境温度为20±5℃，在全血中加入重量百分含量为2‑4％柠檬酸钠溶液，离心后得到血小板丰富血浆；(2)将步骤(1)得到的血小板丰富血浆再深度离心，并用PBS缓冲液洗涤至不再含有血浆及其他血液成分，得到洗涤血小板；(3)将步骤(2)得到的洗涤血小板与3‑马来酰亚胺基苯甲酸‑N‑羟基琥珀酰亚胺酯试剂(MBS)试剂在37±0.5℃的避光环境中震荡反应1～2小时，离心洗涤，得到表面修饰有指向巯基的马来酰亚胺基团的血小板；(4)将抗CD22单抗与Traut’s试剂在37±0.5℃的避光环境中震荡反应1～2小时，然后超滤离心，得到富含巯基的抗CD22单抗；(5)将步骤(3)得到的表面修饰有指向巯基的马来酰亚胺基团的血小板与步骤(4)得到的富含巯基的抗CD22单抗混合，在37±0.5℃的避光环境中震荡反应8～12小时，经离心洗涤，得到连接CD22单抗的血小板；(6)将步骤(5)得到的连接CD22单抗的血小板与抗肿瘤药物在37±0.5℃的避光环境中震荡反应1～2小时，得到抗肿瘤药物与连接CD22单抗的血小板反应物；(7)将步骤(6)得到的抗肿瘤药物与连接CD22单抗的血小板反应物通过琼脂糖凝胶2B分离柱分离，并离心洗涤，得到携载抗肿瘤药物连接CD22单抗的血小板靶向载药体系。