[发明专利]抗烟草青枯病复合微生物菌剂的生产工艺

摘要

本发明提出一种抗烟草青枯病的复合微生物菌剂的生产工艺，所述肥料的原材料包括以下成分胶质芽孢杆菌15～20份、哈茨木霉菌15～20份、细黄链霉菌15～20份、壳寡糖10～35份、植物油泥10～15份、草木灰10～15份，采用菌体制备、配料、复合菌制粒、第一层粘涂植物油泥、第二次粘涂草木灰、第三次粘涂壳寡糖生产工艺，将三种益生菌结合在一起，同时又与抗菌成分壳寡糖形成分离，最大程度发挥各自的功效。本发明利用微生物对青枯病菌的拮抗、杀灭作用及壳寡糖对烟草诱导抗性达到对此病的防治，具有无污染、环境友好、成本低廉、效果持久的优点。

主权项

抗烟草青枯病复合微生物菌剂的生产工艺，其特征如下：a)胶状芽孢杆菌菌体制备：购买菌种，制备菌种培养基，配方为蛋白胨1%，牛肉膏0.3%，氯化钠0.5%，pH7.5,121℃灭菌30min,接入购买菌种，摇床100～150r/min培养24h，此为菌种液；制备扩增培养基，配方为牛肉膏0.4%、酵母浸出粉0.9%、氯化钠0.3%,pH7.5，转入发酵罐进行高温灭菌，灭菌后待温度降低至36℃时，接入5%菌种液，转速100～150r/min培养24～26h，转出发酵液4000r/min离心30min，获得胶状芽孢杆菌菌体；b)哈茨木霉菌制备：购买菌种，制备菌种培养基，配方为无琼脂PDA培养基，25℃接入购买菌种，摇床100～150r/min培养144h，此为菌种液；制备扩增培养基，配方为蔗糖2%、硝酸铵0.5%、磷酸钠0.2%、硫酸镁0.1%，pH9.0，转入发酵罐进行高温灭菌，灭菌后待温度降低至25℃时，接入5%菌种，转速100～150r/min培养144～192h，转出发酵液4000r/min离心30min，获得哈茨木霉菌菌体；c)细黄链霉菌制备：购买菌种，制备菌种培养基，配方为无琼脂PDA培养基，30℃接入购买菌种，摇床100～150r/min培养144h，此为菌种液；制备扩增培养基，配方为葡萄糖1%、淀粉2%、黄豆饼粉1.5%、碳酸钙0.3%、磷酸氢二钾0.05%、硫酸铵0.5%、豆油0.5%，pH自然，转入发酵罐进行高温灭菌，灭菌后待温度降低至30℃时，接入5%菌种，转速100～150r/min培养144～192h，转出发酵液4000r/min离心30min，获得细黄链霉菌菌体；d)配料：称取胶质芽孢杆菌15～20份，哈茨木霉菌15～20份，细黄链霉菌15～20份，混匀备用；e)复合菌制粒：使用高速旋转制粒机对混匀的配料进行治粒，加入湿润剂，转速35Hz搅拌制粒，过6目尼龙网后进行沸腾干燥，45℃干燥至水分为5～8%，获得复合菌颗粒；f)第一层粘涂：将复合菌颗粒加入回转式颗粒包膜机，转速10～15r/min，通入50℃热风预热10～15min，用高压喷枪喷入20～30%酒精溶液至颗粒微微粘结，通入50℃热风2～3min，将植物油泥10～15份均匀地加入包膜机中，转动5～10min后再加入20～30%酒精溶液，反复操作3～5次，获得包泥颗粒；g)第二次粘涂：将包泥颗粒中未粘结的植物油泥移除，通入热风预热10～15min，用高压喷枪喷入20～30%酒精溶液至颗粒微微粘结，通入50℃热风2～3min，将草木灰10～15份均匀地加入包膜机中，转动5～10min后再加入20～30%酒精溶液，反复操作3～5次，获得包灰颗粒；h)第三次粘涂：将包灰颗粒中未粘结的草木灰移除，通入热风预热10～15min，用高压喷枪喷入20～30%酒精溶液至颗粒微微粘结，通入50℃热风2～3min，将壳寡糖10～35份均匀地加入包膜机中，转动5～10min后再加入20～30%酒精溶液，反复操作3～5次，获得包壳寡糖颗粒，50℃烘干至终水分为5～10%，将产品卸出。