[发明专利]一种沼泽小叶桦离体芽快繁方法

摘要

本发明公开了一种沼泽小叶桦离体芽快繁方法，通过外植体的建立、外植体的消毒、外植体防褐化处理、初代培养、增殖培养、生根培养等步骤实现。本发明以3年生实生苗的沼泽小叶桦离体芽为外植体，建立了组培繁殖体系。通过酒精和升汞预处理母本材料，大大降低了外植体的污染率。初代培养基中添加PVP，使褐化现象消失，大大降低了组培风险，提高了成活率。本方法得到的组培苗具有增殖系数高，生根率高，栽植成活力高等特点。有利于沼泽小叶桦的保护与开发，具有广泛应用前景。

主权项

一种沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：1）挑选株高1~1.5 m的未萌动的健壮植株，4~5月份采主枝顶芽、主枝侧芽、侧枝顶芽的新生芽作为外植体；2）在超净工作台上，先用70%的酒精处理外植体20 s，再用0.1%升汞消毒5~20 min，10% NaClO消毒0~20 min，用无菌水冲洗数次；3）将处理好的外植体在无菌的条件下接种到初代培养基上，初代培养基成分为：MS +0.6~1.5mg/L 6‑BA +0.5~1.0 g/L PVP，培养20d以上；4）将外植体转入增殖培养基，增殖培养基成分为：MS +0.4~0.6 mg/L 6‑BA + 0.02 mg/L NAA，培养时间20d以上获得小苗；5）将小苗进行生根培养，生根培养基成分：MS + 0.1~0.5 mg/L NAA，或1/2MS + 0~0.5 mg/L NAA，培养20d以上；7）炼苗移栽：选择健壮的无菌苗，用多菌灵溶液浸泡清洗后，移栽到已消毒的蛭石+珍珠岩的基质中，先保湿培养一周，逐渐去掉盖子，继续生长即可。