[发明专利]一种亲水性多肽纯化的方法在审
申请号: | 201710351738.6 | 申请日: | 2017-05-18 |
公开(公告)号: | CN107163102A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 徐红岩;秦敬国 | 申请(专利权)人: | 吉尔生化(上海)有限公司 |
主分类号: | C07K1/20 | 分类号: | C07K1/20;C07K1/16 |
代理公司: | 上海浦东良风专利代理有限责任公司31113 | 代理人: | 张劲风 |
地址: | 201203 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种亲水性多肽纯化的方法,属于蛋白质与多肽纯化领域。主要解决现在HPLC用于小分子多肽分离时存在常规HPLC上几乎没有保留,对后期的分离纯化造成一定的难度的技术问题。本发明将多肽样品采用凝胶色谱和氨基柱反相色谱两步分离纯化,从而实现最终产品的分离得到高纯度的肽。该方法分离效果好,效率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 亲水性 多肽 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种亲水性多肽纯化的方法,其特征在于包括以下步骤:第一次凝胶色谱纯化步骤:(1)将多肽样品加纯入水中超声搅拌溶解直至澄清,用微孔滤膜过滤;(2)将多肽样品加入到预装好的凝胶柱中,上样量为1‑5倍柱床体积;(3)加入无盐水作为洗脱液,设置合适的流速洗脱分离样品;(4)样品纯度大于90%的收集在一起放置;第二次氨基柱纯化步骤:(1)将上述收集的样品上样至反相色谱系统,洗脱流动相A相为磷酸缓冲液,流动相B相为乙腈;(2)设置洗脱梯度、流速及检测波长;(3)收集目标馏分;(4)将收集馏分冻干称重。
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