[发明专利]一种食品中游离氨基酸含量的测定方法

摘要

本发明涉及氨基酸检测领域，具体而言，涉及一种食品中游离氨基酸含量的测定方法包括以下步骤：对质量为m的待检测物预处理，得到体积为V的检测液；将检测液进行柱前衍生化，得到衍生化的检测液；采用超临界流体色谱仪采用特定参数下检测其中氨基酸的含量，得到检测液所含的氨基酸的质量浓度；通过以下公式分别计算得到所述待检测物中氨基酸的含量：(质量浓度*V)/m。该方法整个超临界流体色谱的检测过程不会超过16min，溶剂用量极少，并且谱图显示完全可以将十七种氨基酸同时分离开，并定量检测出含量，具有检测速度快、有机溶剂用量少、分离度高、灵敏度高、再现性好等优点。

主权项

1.一种食品中游离氨基酸含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：对质量为m的待检测物预处理，得到体积为V的检测液；将所述检测液进行柱前衍生化，得到衍生化的检测液；采用超临界流体色谱仪检测所述衍生化的检测液中氨基酸的含量，得到检测液所含的氨基酸的质量浓度；所述超临界流体色谱仪的检测条件为：色谱柱的直径为3.0mm、柱长为100mm、填料粒径为1.7μm，填料为高密度二醇；流动相为超临界二氧化碳和含有甲酸铵的甲醇乙腈溶液，其中，甲醇与乙腈的体积比为1：0.9‑1.1，甲酸铵在所述甲醇乙腈溶液中的质量百分数为0.18％‑0.22％；采用梯度洗脱，超临界二氧化碳在不同时间段的体积百分比为：0‑0.2min为100％‑95％，0.2‑5.0min为90％‑70％，5.0‑10.5min为80％‑60％，10.5‑16.0min为90％‑70％，16.0‑17.0min为95％‑100％；分析时间：3.5‑16.0min；柱温：40‑60℃；备压：1500‑3000psi；进样量：0.2‑10μl；流速：1.0‑3.0mL/min；检测波长为280nm；通过以下公式分别计算得到所述待检测物中氨基酸的含量：(质量浓度*V)/m；所述衍生化为：依次加入pH为9.0±0.2的1±0.02mol/L硼酸盐标准缓冲液、甲醇、检测液、乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯，混合后超声处理10‑20min，然后在60‑80℃下水浴1.0h以上，去除过量的衍生化试剂；其中，硼酸盐标准缓冲液、甲醇、检测液和乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯的体积比为25：24：24‑26：1。